（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
含錨蛋白重復(fù)序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族12抗體
鈉鉀ATP酶通道蛋白抗體
AGXT2L2蛋白抗體
β淀粉樣蛋白胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白1抗體
錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體
二磷酸腺苷核糖基轉(zhuǎn)移酶3抗體
二磷酸腺苷核糖基轉(zhuǎn)移酶5抗體
腺苷單磷酸脫氨酶1抗體
紅細胞蛋白Ank1抗體
腺苷酸琥珀酸裂解酶抗體
α1B糖蛋白抗體
載脂蛋白B-mRNA編碼蛋白抗體
凋亡誘導(dǎo)因子3抗體
凋亡蛋白活性因子1相互作用蛋白抗體
凋亡誘導(dǎo)蛋白D抗體
酸性神經(jīng)鞘磷脂酶抗體
腺嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)運蛋白1抗體
ATP酶H+轉(zhuǎn)運溶酶體輔助蛋白2抗體
肝素結(jié)合蛋白/陽離子抗菌蛋白37/天青殺素抗體
核突觸蛋白抗體
β-肌動蛋白/β-Actin 抗體（內(nèi)參抗體）
β淀粉樣肽1-42(C端)/β-Amyloid 1-42 (CT)抗體
β淀粉樣肽1-16/Aβ1-16抗體