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相信對(duì)于一些新手E2檢測(cè)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)人員來(lái)說(shuō),實(shí)驗(yàn)做得不理想是難免的事。這不,就在昨天下午,我公司就收到一客戶的咨詢。這位客戶說(shuō)道:“初次用間接法做ELISA實(shí)驗(yàn),做了幾次結(jié)果都沒(méi)有顯色,原因在哪里呢”
針對(duì)問(wèn)題描述,上海恒遠(yuǎn)技術(shù)員分析出為何間接ELISA沒(méi)有顯色,可能原因有這幾個(gè)方面:
1.包被原:包括你的包被液有無(wú)問(wèn)題,有沒(méi)有配錯(cuò)。包被原一般加100微升,37度2小時(shí);
2.封閉:封閉液用的是否適合?你說(shuō)做了幾次都沒(méi)顯色,空白孔也不顯嗎?如果空白也無(wú)顏 色,那封閉就沒(méi)有問(wèn)題。一般封閉是200微升每孔,也可以滿孔封閉
3.一抗:檢查你的一抗是否失效。是否是在37度反應(yīng)
4.二抗:底物,底物緩沖液……這些都要好好檢查!
5.洗滌:用PBST洗滌,包被和封閉時(shí)洗板3次;一抗二抗洗滌5次,每次間隔3分鐘。手工和機(jī)器洗滌沒(méi)什么不同,就是省力一些。洗5次不會(huì)有負(fù)影響,在一抗和二抗洗滌過(guò)程中,恰恰需要多洗幾次,這樣有助于減少非特異性吸附。
做任何E2檢測(cè)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn),都不可能**,我們能做的就是盡zui大的努力減少實(shí)驗(yàn)誤差。
GSK-3 Beta (CT) 內(nèi)皮脂肪酶
GSK-3 Beta (NT) 內(nèi)皮因子12受體抗體
GST tag/GSTM1 內(nèi)皮抑素/內(nèi)皮他丁抗體
GSTA3 內(nèi)皮細(xì)胞特異性分子1抗體
GSTO1/glutathione S transferase Omega 1 內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白激酶抗體
GstP1/GST class-pi 內(nèi)皮細(xì)胞凝集素HL1抗體
GTP cyclohydrolase 1/GTP-CH-1 內(nèi)皮細(xì)胞的分化蛋白6抗體
GTPBP10/Claudin12 內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶2抗體
GTSE-1 內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1抗體
GYG1 內(nèi)皮素受體B抗體
GYG2 內(nèi)皮素受體A抗體
GZMA 內(nèi)皮素-1抗體(抗血清)
E2檢測(cè)ELISA試劑盒