- 重組人Fas配體,His-SUMO標(biāo)簽無(wú)動(dòng)物源FasL?雙12
- 大鼠胰島干細(xì)胞;ALLRPISC2012優(yōu)惠活動(dòng)
- 人APP基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WD10?
- 大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞;RS1優(yōu)惠活動(dòng)
- 如何正確存儲(chǔ)E2檢測(cè)ELISA試劑盒?
- 人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒?”十月節(jié)日過(guò)后的專(zhuān)屬優(yōu)惠活動(dòng)
- 黃牛皮膚細(xì)胞;BTA-S2?
- 庚肝抗體IgM檢測(cè)試劑盒的工作原理與應(yīng)用解析
- 大鼠多巴胺(DA)elisa試劑盒?開(kāi)學(xué)季特惠”與中秋團(tuán)圓禮包活動(dòng)火熱進(jìn)行
- 大鼠肌肉成纖維樣細(xì)胞;RM1九月開(kāi)學(xué)季優(yōu)惠活動(dòng)
艱難梭菌(TCD-B)核酸檢測(cè)試劑盒反應(yīng)的特異性決定因素:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。