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肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白CElisa試劑盒免疫測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)化的難點(diǎn)在于蛋白的不均一性、基質(zhì)效應(yīng)、交叉反應(yīng)以及需要測(cè)定接近測(cè)定方法下限的濃度等,所測(cè)定的免疫反應(yīng)性通常是在糖基化、降解和復(fù)合形式上有差異的蛋白同種型的混合體。
基質(zhì)效應(yīng)
免疫測(cè)定的基質(zhì)效應(yīng)通常定義為干擾抗原和抗體間反應(yīng)但與分析物本身無(wú)關(guān)的非特異
因素?;|(zhì)效應(yīng)與測(cè)定模式和抗體選擇有較大關(guān)系,因此,其對(duì)不同免疫測(cè)定的影響方式也有所不同?;|(zhì)效應(yīng)通常由蛋白、鹽、磷脂、補(bǔ)體、抗免疫球蛋白抗體(類風(fēng)濕因子和人抗鼠抗體)、藥物和可能污染樣本的物質(zhì)引起。這些效應(yīng)可通過(guò)仔細(xì)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)來(lái)減少,例如使用一定亞型的高親和力抗體或抗體片段、降低樣本對(duì)總測(cè)定體積的比例、在測(cè)定緩沖液中加入免疫球蛋白、理想的溫育溫度和較長(zhǎng)的溫育時(shí)間。免疫測(cè)定的校準(zhǔn)物通常用類似于樣本的基質(zhì)的緩沖液制備,基質(zhì)可為無(wú)分析物的人血清、無(wú)免疫學(xué)交叉反應(yīng)抗原的動(dòng)物血清或蛋白含量類似于樣本的人工緩沖液等。因?yàn)檠宓某煞指饔胁煌?,每批血清基質(zhì)的差異有可能會(huì)影響校準(zhǔn),因此以純蛋白溶液作為基質(zhì)較容易保持一致,但對(duì)于結(jié)合至血清蛋白的激索來(lái)說(shuō),除了人血清外,其他基質(zhì)不能使用。
血清和血漿中總蛋白和鹽的濃度相當(dāng)穩(wěn)定,但尿液中鹽濃度則變化較大,鹽濃度增加對(duì)抗原抗體間反應(yīng)起一個(gè)抑制作用。如果樣本體積小于總反應(yīng)體積的10%~15%,則蛋白的影響不明顯,但有時(shí)為提高測(cè)定的敏感性,常需一個(gè)較大的樣本體積。因此,要求參考方法具有低的測(cè)定下限,且樣本體積對(duì)總反應(yīng)體積應(yīng)小至足以排除大部分基質(zhì)效應(yīng)。
樣本中的免疫球蛋白可通過(guò)與測(cè)定中所使用的特異抗體發(fā)生反應(yīng)而影響測(cè)定結(jié)果。如自身免疫病患者常有可與抗體反應(yīng)的類風(fēng)濕因子(RF)針對(duì)動(dòng)物免疫球蛋白的嗜異性天然抗體相當(dāng)普遍,但一般情況下其濃度和親和力較低。自身抗體和嗜異性天然抗體的存在通常會(huì)引起假陽(yáng)性反應(yīng)。這些干擾可通過(guò)加入足量的來(lái)自同一種系的免疫球蛋白而減小,也可在測(cè)定中使用抗體的Fab或(F‘ab)2片段替代完整抗體來(lái)減小干擾,但如果樣本含有針對(duì)試劑抗體的個(gè)體基因型(idiotype)抗體,則這種方法無(wú)效。這種情況下只有將免疫球蛋白從樣本中去除或使用一個(gè)依據(jù)另一個(gè)抗體的方法測(cè)定。
各種補(bǔ)體成分均能與抗體反應(yīng),從而肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白CElisa試劑盒干擾試劑抗體結(jié)合抗原及與次級(jí)抗體反應(yīng)的能力,在雙夾心測(cè)定中可引起假陽(yáng)性,在競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)中引起假陽(yáng)性。小鼠IgG2,和IgG2,免疫球蛋白亞對(duì)補(bǔ)體的效應(yīng)尤為敏感??赏ㄟ^(guò)加熱樣本或在反應(yīng)緩沖液中加入螯合劑來(lái)排除補(bǔ)體的干擾,但加熱會(huì)影響很多的分析物,而螯合劑對(duì)諸如鍺螯合劑和酶等非放射性核索標(biāo)記物有干擾,因此傾向于使用對(duì)補(bǔ)體效應(yīng)不敏感的抗體或抗體片段建立測(cè)定方法。
有報(bào)道稱磷脂在類固醇測(cè)定中可干擾抗原的結(jié)合而引起結(jié)果的假增高,許多其他因子如血清分離膠中的成分、抗凝劑去垢劑、藥物、非酯化脂肪酸等對(duì)某些免疫測(cè)定也有干擾。
常溫,避光 規(guī)格: 50mg *: 含量測(cè)定
常溫,避光 規(guī)格: 100mg *: 含量測(cè)定
常溫,避光 規(guī)格: 100mg *: 含量測(cè)定
常溫,避光 規(guī)格: 50mg *: 檢查用 依他尼酸
常溫,避光 規(guī)格: 100mg *: 含量測(cè)定
常溫,避光 規(guī)格: 100mg *: 含量測(cè)定 鹽酸
肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白CElisa試劑盒
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