產品名稱:血管內皮鈣黏蛋白5ELISA檢測試劑盒
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產品型號:48T/96T
更新日期:2021-04-29
訪問次數:422
48T/96T血管內皮鈣黏蛋白5ELISA檢測試劑盒的詳細資料:
需要而未提供的試劑和器材:
1. 產品僅用于科研標準規(guī)格酶標儀
2. 高速離心機
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等。
注:本公司提供試劑盒免費代測服務。需要其他檢測試劑盒請咨詢銷售人員。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
血管內皮鈣黏蛋白5ELISA檢測試劑盒 | Cadherin 5 | EY-E98940 |
標本的采集與保存:
1、血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2 小時或4oC 過夜,然后1000×g 離心20 分鐘,取上清即
可,或將上清置于-20oC 或-80oC 保存,但應避免反復凍融。
2、血漿:用EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30 分鐘內于2-8oC 1000×g 離心15 分鐘,
取上清即可檢測,或將上清置于-20oC 或-80oC 保存,但應避免反復凍融。
3、組織勻漿:
1) 取適量組織塊,于預冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,稱重后備用(組織塊較大需先剪碎后再勻漿);
2) 可同時選用多種勻漿方法達到較好的破碎效果:首先將組織塊移入玻璃勻漿器,加入5-10mL 預冷PBS 進行充分研磨,該過程需在冰上進行(有條件實驗室可選用機器勻漿);得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復凍融進一步處理(超聲破碎過程中注意冰浴降溫;反復凍融法可重復2 次)。
3) 將制備好的勻漿液于5000×g 離心5 分鐘,留取上清即可檢測。
4、其它生物標本:請1000×g 離心20 分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20oC 或-80oC 保存,但應避免反復凍融。
操作步驟:
夾心法,一般的操作步驟為:
將具有專一性的抗體固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗體;
加入待測檢體,檢體中若含有待測的抗原,則其會與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結;
洗去多余待測檢體,加入另一種對抗原專一的一次抗體,與待測抗原進行鍵結;
洗去多余未鍵結一次抗體,加入帶有酶的二次抗體,與一次抗體鍵結;
洗去多余未鍵結二次抗體,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或儀器讀取呈色結果;
間接法,一般的操作步驟為:
將已知的抗原固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余的抗原。
加入待測檢體,檢體中若含有待測的一次抗體,則其會與塑膠孔盤上的抗原進行專一性鍵結。
洗去多余待測檢體,加入帶有酶的二次抗體,與待測的一次抗體鍵結。
洗去多余未鍵結二次抗體,加入酶底物使酶呈色,藉儀器測定塑膠盤中的吸光值,以評估有色終產物的含量即可測量待測抗體的含量。
競爭法,其操作步驟為:
將具有專一性的抗體固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗體
加入待測檢體,使檢體中的待測抗原與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結
加入帶有酶的抗原,此抗原也可與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結,由于塑膠孔盤上固著的抗體數量有限,因此當檢體中抗原的量越多,則帶有酶的抗原可鍵結的固著抗體就越少,亦即,兩種抗原皆競相與塑膠孔盤上抗體鍵結,即所謂競爭法之由來。
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