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細胞簡介：

卵巢不僅是卵子產(chǎn)生、生長并成熟的器官，也是腦垂體前葉分泌的靶器官之一。卵巢分為內(nèi)、外側兩面，其中，內(nèi)側面朝向盆腔，多與回腸緊鄰。

探明卵巢內(nèi)膜細胞的增值及功能，在發(fā)情周期和妊娠期發(fā)生變化的機理及調(diào)控因素，對進一步研究卵泡發(fā)育的調(diào)控、排卵、黃體形成和退化、卵巢等發(fā)病機理，以及在這些生理和病理過程中參與其中的及細胞因子作用機理均有重要意義。

細胞特性：

1）組織來源于實驗動物的正常卵巢組織。

2）細胞鑒定：波形蛋白（Vimentin）熒光染色為陽性。

3）經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。

4）不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5）細胞生長方式：梭形細胞，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基：

我們推薦使用 DELF 原代 內(nèi)膜 細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

人多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)elisa分析檢測試劑盒

貓elisa分析檢測試劑盒

組織前列腺型酸性磷酸酶（PACP）活性比色法定量檢測試劑盒

小鼠肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)elisa檢測試劑盒

大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)elisa檢測試劑盒

活體細胞半胱-5（CASPASE-5）活性原位熒光染色檢測試劑盒

人CXC趨化因子受體4(CXCR4)elisa分析檢測試劑盒

大鼠L-乳酸脫氫酶(L-LDH)elisa檢測試劑盒

小鼠前白蛋白(PA)elisa分析檢測試劑盒

22號染色體開放閱讀框23抗體 C22orf23

5號染色體開放閱讀框51抗體 C5orf51

肌側索硬化癥相關蛋白3抗體 ALS2CR3

脊髓性肌癥蛋白SMA/抗體 Gemin 1

R Cadherin/CDH4 R Cadherin

Ras相關區(qū)域家族1A抗體 RASSF3

絲/蘇蛋白磷酸酶4C抗體 PPP4C

四連接源蛋白FJX1抗體 FJX1

FITC標記人CD3單克隆抗體 human CD3-FITC

FMO9P蛋白抗體 FMO9P

硫氧還蛋白還原酶抗體 2 Cys Peroxiredoxin

球蛋白λ輕鏈恒定區(qū)1抗體 IGLC1

低密度脂蛋白受體相關蛋白5抗體 LRP5

短鏈脫氫酶/還原酶家族4樣2蛋白抗體 DHRS4L2

雄調(diào)節(jié)樣蛋白抗體 HN1L

煙堿型乙酰受體β4抗體 CHRNB4

一步法PCR反應液

異檸檬酸脫氫酶3 beta亞基抗體

IDH3B

藍色敏感的視色素 (厚皮螺旋體) 抗體

兔卵巢內(nèi)膜細胞blue-sensitive visual pigment