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三、提供全程技術(shù)指導(dǎo)。

人內(nèi)皮脂肪酶（EL）DRGelisa試劑盒 Human Endothelial lipase,EL ELISA Kit
EL DRGelisa試劑盒說明書【實驗用途】內(nèi)皮脂肪酶(Endothelial lipase,EL)是近幾年被發(fā)現(xiàn)的一個脂肪酶家族新成員.1999年Hirata等利用削減雜交在培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中*克隆到了EL,同年,Jaye等利用其他方法也證實了EL.近,人們又克隆出了EL的兩種異構(gòu)體,它們存在于內(nèi)皮細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi),但并沒有脂肪酶活性。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒（ELISA）。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體，經(jīng)（biotin）標(biāo)記。樣品和標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng)；經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。
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操作流程：
（1）EL DRGelisa試劑盒說明書待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
試劑盒組成及試劑配制 ：
1.EL DRGelisa試劑盒說明書 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。 
2. 標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶
4. 標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6. 標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。 
9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
兔子Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)ELISA Kit  *

兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA Kit  *

兔子α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA Kit  *

兔子α干擾素(IFN-α)ELISA Kit  *

兔子β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA Kit  *

兔子γ干擾素(IFN-γ)ELISA Kit  *

兔子白介素1(IL-1)ELISA Kit  *

兔子白介素10(IL-10)ELISA Kit  *

兔子白介素1β (IL-1β)ELISA Kit  *

兔子白介素1可溶性受體I (IL-1sR Ⅰ)ELISA Kit  *

兔子白介素2(IL-2)ELISA Kit  *

兔子白介素3(IL-3)ELISA Kit  *
高pH 緩沖液套裝　30次　High pH Buffer Set　常溫保存（5×高pH上樣液需要-20℃保存）

中pH 緩沖液套裝　30次　Medium pH Buffer Set　常溫保存（5×中pH上樣液需要-20℃保存）

低pH 緩沖液套裝　30次　Low pH Buffer Set　常溫保存（5×低pH上樣液需要-20℃保存）

銀染清除劑　30次　Silver Stain Erasol　常溫保存

終點顯色法內(nèi)毒素定量試劑盒　32次　Chromogenic End-point TAL Kit 　4℃避光保存

DNA UV防護(hù)劑　3g　NDAUV Erasol　4℃保存

蛋白去除試劑S　3g 　Oxidative Stress Detection Kit　常溫保存

Tubulin-Tracker Red（微管紅色熒光探針）　40 μl　Fluorescent Probe and Tracer　-20℃保存

限制性內(nèi)切酶NdeI　400 U　Restriction Endonuclease　-20℃保存

乙酰化牛血清白蛋白　400µL　Bovine Serum Albumin, Acetylated　-20℃保存

Phosphate Buffered Saline,10X (for blot washing)　4000mL　Phosphate Buffered Saline,10X (for blot washing)　常溫保存

RNase抑制劑（人源）　400U　Human RNase Inhibitor　-20℃保存

雙脫氧dNTP溶液（10mM）　40uL×4　ddNTP Solution　-20℃保存

miRNA PAGE膠回收試劑盒　40次　miRNABACK　4℃保存

超氧化物歧化酶測試盒　48 T　Oxidative Stress Detection Kit　常溫保存
EL DRGelisa試劑盒說明書動物糖蛋白麥芽凝集素（WGA）樹脂法純化試劑盒5次*

動物糖蛋白化學(xué)法*糖基分解試劑盒20次*

動物糖蛋白電泳遷移檢測試劑盒5次*

動物糖蛋白刀豆蛋白A（ConA）樹脂法純化試劑盒5次*

動物糖蛋白氨基苯硼酸（APA）樹脂法純化試劑盒5次*

動物腎臟組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10次*

動物腎上腺組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10次*

動物神經(jīng)組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10次*