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細(xì)胞名稱  Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞；231-Cas9-547品牌
形態(tài)特性 上皮樣

生長特性 貼壁生長

特征特性 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使MDA-MB-231細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo，經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS；400ug/ml G418

傳代方法 1:2~1:4傳代；每周2~3次。

傳代情況 C3

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

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【培養(yǎng)指南】
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞；231-Cas9-547品牌對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞；231-Cas9-547品牌凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫全國各地均可發(fā)貨，全國統(tǒng)一價格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。

細(xì)胞分類：
*種：
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞；231-Cas9-547品牌是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不這種，也較少使用這種方式，因為復(fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲存的方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，進(jìn)口來源，保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞；231-Cas9-547品牌現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、*、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。
250克Casein Agar Medium水解酪蛋白瓊脂

250克Ammonium Dextrose Medium葡萄糖銨培養(yǎng)基

250克Dextrose Semisolid Medium葡萄糖半固體發(fā)酵管

250克Kilgler Iron Agar克氏雙糖鐵瓊脂

250克Phosphate Glucose Peptone Water磷酸鹽葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基

100克Korser Citrate Sodium BrothKORSER氏檸檬酸鹽肉湯

250克VRBA結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂

250克Salmonella Arizona AgarSA瓊脂

TFAR19/PDCD5  凋亡相關(guān)蛋白5抗體   規(guī)格 0.1ml*

Tetraspan 5  四分子交聯(lián)體5抗體   規(guī)格 0.1ml*

Tetranectin/CLEC3B/TNA  四連接素TN抗體   規(guī)格 0.2ml*

Tetracycline  四環(huán)素抗體   規(guī)格 0.2ml*

TET2  甲基雙加氧酶TET2抗體   規(guī)格 0.2ml*

TET1/CXXC6  Ten-eleven轉(zhuǎn)運基因1蛋白抗體   規(guī)格 0.2ml*

Testis  腫瘤抑制基因Testin抗體   規(guī)格 0.2ml*

TERT/EST2/Telomerase reverse transcriptase  端粒酶相關(guān)蛋白2抗體（端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶）   規(guī)格 0.2ml*

TERT  端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶抗體   規(guī)格 0.1ml*

TEP1  端粒酶相關(guān)蛋白1抗體   規(guī)格 0.2ml*

Tenascin C/Tn-C  細(xì)胞粘合素(固生蛋白)抗體   規(guī)格 0.1ml*

Tenascin C (C terminal)  細(xì)胞粘合素抗體(C端)腱糖蛋白-C(固生蛋白)抗體   規(guī)格 0.1ml*
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞；231-Cas9-547品牌Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy7  Cy7標(biāo)記的小鼠抗兔IgM   規(guī)格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy5.5  Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗兔IgM   規(guī)格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy5  Cy5標(biāo)記的小鼠抗兔IgM   規(guī)格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy3  Cy3標(biāo)記的小鼠抗兔IgM   規(guī)格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/Bio  標(biāo)記的小鼠抗兔IgM   規(guī)格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/APC  APC標(biāo)記的小鼠抗兔IgM   規(guī)格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/AP  堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的小鼠抗兔IgM   規(guī)格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗兔IgM   規(guī)格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標(biāo)記的小鼠抗兔IgM   規(guī)格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗兔IgM   規(guī)格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗兔IgM   規(guī)格 0.1ml*

Mouse Anti-Rabbit IgM  小鼠抗兔IgM   規(guī)格 1mg*