產(chǎn)品名稱:Cas9穩(wěn)定表達的人乳腺癌細胞;231-Cas9-550
產(chǎn)品特點:購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的細胞名稱、種屬、貨號、數(shù)量、細胞價格并預約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取Cas9穩(wěn)定表達的人乳腺癌細胞;231-Cas9-550保存并認真閱讀以方便你的實驗操作。
產(chǎn)品型號:
更新日期:2019-01-25
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Cas9穩(wěn)定表達的人乳腺癌細胞;231-Cas9-550的詳細資料:
Cas9穩(wěn)定表達的人乳腺癌細胞;231-Cas9-550保存現(xiàn)貨供應,質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。
產(chǎn)品名稱 | Cas9穩(wěn)定表達的人乳腺癌細胞;231-Cas9-550保存 |
生長特性 | 貼壁生長 |
價格 | 點擊了解 |
細胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達的人乳腺癌細胞;231-Cas9-550保存
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是采用慢病毒感染的方式使MDA-MB-231細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Puromycin,經(jīng)2ug/ml嘌呤霉素篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS;2ug/ml Puromycin
傳代方法 1:2~1:4傳代;每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FB飥#?
細胞分類:
*種:
Cas9穩(wěn)定表達的人乳腺癌細胞;231-Cas9-550保存是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,干冰運輸給客戶。一般不這種,也較少使用這種方式,因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,一旦細胞狀態(tài)不好,很難說是細胞自身不行,還是復蘇沒操作好;另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細胞儲存的方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種:
是我們復蘇好細胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,排除復蘇造成影響,常溫運輸也對細胞影響也不大,只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進口來源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
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250克A1 MediumA1培養(yǎng)基
250克Yeast Extract Agar酵母提取物瓊脂
250克Lactose Peptone Broth乳糖蛋白胨肉湯
250克Cary-Blair Transfort MediumCary-Blair氏運送培養(yǎng)基
250克MFC MediumMFC培養(yǎng)基
250克Brilliant Green Lactose Medium亮綠乳糖培養(yǎng)基
250克Lecithin Tween 80 Nutrient Agar吐溫80營養(yǎng)瓊脂
250克Acetamide Agar乙酰胺瓊脂
TCHP 抑癌蛋白TCHP抗體 規(guī)格 0.2ml*
TCF9/GCF 轉(zhuǎn)錄因子9抗體 規(guī)格 0.2ml*
TCF7L2 轉(zhuǎn)錄因子7類似物2抗體 規(guī)格 0.1ml*
TCF3/E2A/E47 轉(zhuǎn)錄因子3抗體(螺旋環(huán)螺旋蛋白HE47) 規(guī)格 0.2ml*
TCF12/HEB 轉(zhuǎn)錄因子12抗體 規(guī)格 0.2ml*
TCERG1/CA150 轉(zhuǎn)錄延伸調(diào)節(jié)蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml*
TCEB3/Elongin A 轉(zhuǎn)錄延伸因子3抗體 規(guī)格 0.1m*
TBX-5 轉(zhuǎn)錄因子Tbx5抗體 規(guī)格 0.1ml*
TBX3 轉(zhuǎn)錄因子Tbx3抗體 規(guī)格 0.2ml*
Tbx21/T-bet T細胞介導的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子Tbx21抗體 規(guī)格 0.1ml*
TBX2/T-box2 血栓素B2抗體(一種新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因) 規(guī)格 0.2ml*
TBX2/T-box2 新型抑癌基因抗體 規(guī)格 0.2ml*
Cas9穩(wěn)定表達的人乳腺癌細胞;231-Cas9-550保存Mouse Anti-rabbit IgG/Cy3 Cy3標記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml*
Mouse Anti-rabbit IgG/Bio 標記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml*
Mouse Anti-rabbit IgG/APC APC標記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml*
Mouse Anti-rabbit IgG/AP 堿性磷酸酶(AP)標記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml*
Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml*
Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml*
Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml*
Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的小鼠抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml*
Mouse anti-rabbit IgG ascites 小鼠抗兔IgG腹水 規(guī)格 1ml*
Mouse Anti-rabbit IgG 小鼠抗兔IgG 規(guī)格 1mg*
Mouse Anti-human IgM/RBITC 羅丹明標記的小鼠抗人IgM 規(guī)格 0.1ml*
Mouse Anti-human IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標記的小鼠抗人IgM 規(guī)格 0.1ml*
【培養(yǎng)指南】
Cas9穩(wěn)定表達的人乳腺癌細胞;231-Cas9-550保存對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細胞凍存】
待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行Cas9穩(wěn)定表達的人乳腺癌細胞;231-Cas9-550保存凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
【復蘇的原則】
快速融化:必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃,使細胞外凍存時的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結(jié)晶,對細胞造成損害。復旦細胞庫全國各地均可發(fā)貨,全國統(tǒng)一價格,本公司出售的所有細胞僅供科研使用。
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