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本公司代理ATCC細胞，提供小鼠皮下結(jié)締組織細胞；LWnt-3A運輸售前售后一條龍服務(wù)，若要獲取詳細的說明書或價格信息，點擊了解更多小鼠源細胞。

細胞名稱  小鼠皮下結(jié)締組織細胞；LWnt-3A運輸
形態(tài)特性 成纖維細胞

生長特性 貼壁生長

特征特性 L-M(TK-) cells (ATCC CCL-1.3) 用Wnt-3A表達載體轉(zhuǎn)染并在含G418的培養(yǎng)基中篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株。 Wnt-3A基因編碼一個有變異的信號功效分泌性糖蛋白。 Wnt基因控制胚胎發(fā)過程中的許多模式形成和生長事件。 這些細胞分泌有生物活性的Wnt-3A蛋白。 它們是目前Wnt-3A條件培養(yǎng)基的好來源。 由于這種條件培養(yǎng)基還包含Wnt-3A蛋白外的其他因子，對于涉及Wnt-3A條件培養(yǎng)基的實驗有必要用其來源細胞株(ATCC CRL-
細胞培養(yǎng)步驟：
一．小鼠皮下結(jié)締組織細胞；LWnt-3A運輸培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
注意事項：
1.收到小鼠皮下結(jié)締組織細胞；LWnt-3A運輸后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)絡(luò)。
2.收到細胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時（視細胞密度而定）穩(wěn)定細胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收細胞時就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據(jù)。
3.由于細胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?，故本公司只保證客戶收到細胞后一周內(nèi)的細胞狀態(tài)，故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明，期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測定LithiumlactateDL-乳酸鋰(>98%,BR)

質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRDL-TryptophanDL-

質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品DL-tert-LeucineDL-叔

質(zhì)量規(guī)格：VE含量≥260.00mg/gasdl-α-tocopherolDL-SerineDL-

質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,CPDL-ThreonineDL-

質(zhì)量規(guī)格：>98%DL-AsparticacidDL-天冬氨酸

質(zhì)量規(guī)格：>98%DL-AsparaginemonohydrateDL-天冬酰胺，一水

質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品DL-SelenomethionineDL-硒代蛋氨酸(USP)

HMy2.CIR細胞株pCI2ug

HO-8910PM細胞株pCI-neo2ug

HO-8910細胞株pCLEco2ug

HOS細胞株pCL12ug

HP615細胞株pCL-Ampho2ug

HPAC細胞株pCMS-EGFP2ug

Hs578T細胞株pCMV/Myc/Mito2ug

HSC-T6細胞株pCMV/Myc/Nuc/GFP2ug

HT1080細胞株pCMV52ug

HT-29（RFP）細胞株pCMV5（noNdeI）2ug

HT-29細胞株pCMV5-3002ug

HuH-6細胞株pCMV5-Flag2ug

HuH-7細胞株pCMV5-HA2ug

HuT78細胞株pCMV5-Myc2ug

HuTu-80細胞株pCMV6entry2ug
小鼠皮下結(jié)締組織細胞；LWnt-3A運輸ANKRD9  錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白9多克隆抗體     0.2ml

ANKS1A  錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白1A多克隆抗體     0.2ml

ANKS1B/AIDA1  β淀粉樣蛋白胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白1多克隆抗體     0.2ml

ANKS3  錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白3多克隆抗體     0.2ml

ANKS6  錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白6多克隆抗體     0.2ml

Ankyrin B/Ankyrin brain  錨定蛋白B多克隆抗體     0.2ml

Ankyrin erythroid  紅細胞蛋白Ank1多克隆抗體     0.2ml

Ankyrin G  錨定蛋白G多克隆抗體     0.2ml

Annexin Ⅲ  膜粘連蛋白A3多克隆抗體     0.1ml

Annexin A1  膜粘連蛋白A1多克隆抗體     0.1ml

Annexin A10/14  膜粘連蛋白10多克隆抗體     0.1ml

Annexin A7  膜粘連蛋白7多克隆抗體     0.2ml

小鼠皮下結(jié)締組織細胞；LWnt-3A運輸在運輸?shù)倪^程中，細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，因此客戶在收到貨以后的*時間是要先觀察產(chǎn)品的狀況，顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時，請不要立即打開培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱過夜，并于次日在顯微鏡下觀察，此時多數(shù)細胞會重新貼附于瓶壁。如果發(fā)現(xiàn)細胞仍不能貼壁，請試著用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理；如若證實細胞無活力，請在收到貨后48小時內(nèi)將細胞狀態(tài)反饋給我公司，我們將盡快幫助解決。