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產(chǎn)品名稱:尖孢鐮刀菌LAMP試劑盒(植物病原)

產(chǎn)品特點(diǎn):尖孢鐮刀菌LAMP試劑盒(植物病原)上海一研生物相關(guān)產(chǎn)品:結(jié)晶碳酸鉀分子式:165.23英文名稱:Potassium carbonate:6381-79-9分子量: K2CO3&

2-氟分子式:222英文名稱:2- fluorine iodobenzene:348-52-7分子量: C6H4FI

2-羥喹惡啉分子式:英文名稱:2- hydroxy group

產(chǎn)品型號:50次

更新日期:2021-02-07

訪問次數(shù):232

50次尖孢鐮刀菌LAMP試劑盒(植物病原)的詳細(xì)資料:

參數(shù)規(guī)格:

產(chǎn)品名稱

尖孢鐮刀菌LAMP試劑盒(植物病原)

英文名稱

 Lamp kit for Fusarium oxysporum (plant pathogens)

規(guī)格

50次

儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

1,2,3-三氟分子式:132.08英文名稱:Three - 1,2,3-:1489-53-8分子量: C6H3F3

3,5-二溴吡N-氧物分子式:252.89英文名稱:3,5- dibromopyridine N- oxide:2402-99-5分子量: C5H3Br2NO

DL-α-Tocopherolmethoxypolyethyleneglycolsuccinatesolution英文名稱:DL- -Tocopherol methoxypolyethylene glycol succinate solution分子式:分子量::1309573-60-1

結(jié)晶碳酸鉀分子式:165.23英文名稱:Potassium carbonate:6381-79-9分子量: K2CO3&

2-氟分子式:222英文名稱:2- fluorine iodobenzene:348-52-7分子量: C6H4FI

2-羥喹惡啉分子式:英文名稱:2- hydroxy group:分子量:

α,α,α'-三(4-羥)-1-乙-4-異丙分子式:424.54英文名稱:Alpha, alpha, alpha '- three (4- hydroxyphenyl) -1- ethyl -4- Cumene:110726-28-8分子量: C29H28O3

3--9-乙咔唑(AEC)英文名稱:3- -9- (AEC) - ethylcarbazole分子式:210.28分子量: C14H14N2:132-32-1

(R)-(-)-DBD-APy分子式:311.36英文名稱:(R)-(-)- DBD治療:143112-49-6分子量: C12H17N5O3S

尖孢鐮刀菌LAMP試劑盒(植物病原)小鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 ELISA配對抗體

小鼠 TNFRSF10B / TRAILR2 基因全長ORF克隆

甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

FGF7 基因全長ORF克隆

OPALIN 基因全長ORF克隆

小鼠 EPHA7 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽

PIP 基因全長ORF克隆

食蟹猴 CD73 / NT5E 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

Soggy-1 基因全長ORF克隆

M-CSFR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

重組人 ANGPTL4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

小鼠 IFNA13 / Interferon alpha-13 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 

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