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產(chǎn)品名稱:小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1保存
產(chǎn)品特點:了解更多小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1保存,相關(guān)資料如:說明書、培養(yǎng)條件、注意事項及售后可咨詢我們在線客服。收到細(xì)胞后請盡快更換為含10% FBS的新鮮培養(yǎng)基,不建議使用原瓶中運輸用培養(yǎng)基。
產(chǎn)品型號:
更新日期:2019-02-19
訪問次數(shù):708
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1保存的詳細(xì)資料:
本公司代理ATCC細(xì)胞,提供小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1保存售前售后一條龍服務(wù),若要獲取詳細(xì)的說明書或價格信息,點擊了解更多小鼠源細(xì)胞。
細(xì)胞名稱 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1保存
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 3T3-L1是從3T3細(xì)胞(Swiss albino)中經(jīng)克隆分離得到的連續(xù)傳代的亞系。該細(xì)胞從快速分裂到匯合和接觸性抑制狀態(tài)經(jīng)歷了前脂肪細(xì)胞到脂肪樣細(xì)胞的轉(zhuǎn)變。該細(xì)胞鼠痘病毒陰性;可產(chǎn)生甘油三酯,高濃度血清可增強細(xì)胞內(nèi)脂肪堆積。
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS
傳代方法 1:
3傳代;3-4天一次
傳代情況
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1保存在運輸?shù)倪^程中,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來,因此客戶在收到貨以后的*時間是要先觀察產(chǎn)品的狀況,顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時,請不要立即打開培養(yǎng)瓶,應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱過夜,并于次日在顯微鏡下觀察,此時多數(shù)細(xì)胞會重新貼附于瓶壁。如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞仍不能貼壁,請試著用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,如臺盼藍(lán)染色證實細(xì)胞活力正常請按懸浮細(xì)胞的方法處理;如若證實細(xì)胞無活力,請在收到貨后48小時內(nèi)將細(xì)胞狀態(tài)反饋給我公司,我們將盡快幫助解決。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1保存培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
注意事項:
1.收到小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1保存后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)絡(luò)。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細(xì)胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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質(zhì)量規(guī)格:美國進口Diosgeninglucoside延齡草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)
質(zhì)量規(guī)格:美國進口Bergenin
質(zhì)量規(guī)格:美國進口Bergenin(標(biāo)準(zhǔn)品)
質(zhì)量規(guī)格:美國進口JolkinolideB巖大戟內(nèi)酯B(標(biāo)準(zhǔn)品)
質(zhì)量規(guī)格:美國進口Petroselinicacid巖芹酸(標(biāo)準(zhǔn)品)
質(zhì)量規(guī)格:美國進口Fucoxanthin巖藻黃質(zhì);褐藻素
質(zhì)量規(guī)格:美國進口L-(-)-Fucose巖藻糖;L-巖藻糖
質(zhì)量規(guī)格:美國進口Salinomycin鹽霉素,沙利霉素
丙胺雜質(zhì)ACAS訂購|咨詢規(guī)格:100mg
恩卡韋CAS訂購|咨詢規(guī)格:100mg
洋地黃CAS訂購|咨詢規(guī)格:約2.5g
派可林酸CAS535-75-1訂購|咨詢規(guī)格:20mg
烏梅CAS訂購|咨詢規(guī)格:2g
CAS訂購|咨詢規(guī)格:250mg
野菊花CAS訂購|咨詢規(guī)格:1g
枳實(酸橙)CAS訂購|咨詢規(guī)格:1g
草素CAS73-03-0訂購|咨詢規(guī)格:20mg
二羥丙CAS479-18-5訂購|咨詢規(guī)格:100mg
CAS3569-99-1訂購|咨詢規(guī)格:100mg
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1保存Vimentin 波形蛋白多克隆抗體 0.1ml
Vinculin 粘著斑蛋白多克隆抗體 0.1ml
VIP 血管活性腸肽多克隆抗體 0.1ml
VIP Receptor 1/VAPC1 血管活性腸肽受體-1多克隆抗體 0.1ml
VIP receptor 2/VPAC2 腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體-II/血管活性腸肽受體-II多克隆抗體 0.1ml
Viperin/RSAD2 病毒抑制蛋白Viperin多克隆抗體 0.2ml
Visfatin-1(CT) 內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(C端多克隆抗體) 0.1ml
Vitamin D Binding protein 結(jié)合蛋白多克隆抗體 0.2ml
Vitamin D Receptor/VDR 3受體多克隆抗體 0.2ml
VLDL Receptor 極低密度脂蛋白受體多克隆抗體 0.1ml
VMAT1/VAT1 嗜鉻顆粒胺轉(zhuǎn)運蛋白VAT1多克隆抗體 0.1ml
VMAT2 腦單胺類神經(jīng)遞質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白多克隆抗體 0.2ml
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