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產(chǎn)品名稱:乙型肝炎病毒前基因組LAMP試劑盒

產(chǎn)品特點:乙型肝炎病毒前基因組LAMP試劑盒上海一研生物相關(guān)產(chǎn)品:The adjacent benzene three phenol red分子式:400.36分子量: C19H12O8S:32638-88-3

A-甲吡分子式:英文名稱:A- methyl pyridine:分子量:

4,5-二氯-1,2-二甲咪唑分子式:165.023英文名稱:4,5- two -1,2- twoCA

產(chǎn)品型號:50次

更新日期:2021-02-20

訪問次數(shù):331

50次乙型肝炎病毒前基因組LAMP試劑盒的詳細資料:

儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

參數(shù)規(guī)格:

產(chǎn)品名稱

乙型肝炎病毒前基因組LAMP試劑盒

英文名稱

 Lamp kit for hepatitis B Virus Pre genome

規(guī)格

50次

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使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。 
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

2,3,5-三氟-4-吡分子式:210.45英文名稱:2,3,5- three -4- pyridine formaldehyde:266312-20-3分子量: C6H2Cl3NO

亞砜分子式:206.26英文名稱:Aldicarb sulfoxide:1646-87-3分子量: C7H14N2O3S

4-分子式:161.25英文名稱:4- phenylpiperidine:771-99-3分子量: C11H15N

貝母素甲英文名稱:Peimine分子式:431.6511分子量:C27H45NO3:23496-41-5

6-溴-2-乙酰吡分子式:200.03英文名稱:6- -2- acetyl pyridine:49669-13-8分子量: C7H6BrNO

3,4-二乙氧硝分子式:英文名稱:3,4- two of nitrobenzene:分子量: C10H13NO4

5--3-溴-2-氯吡分子式:207.46英文名稱:5- amino -3- -2-:130284-53-6分子量: C5H4BrClN2

(R)-(-)-NBD-Py-NCS分子式:291.29英文名稱:(R) - (-) -NBD-Py-NCS:163927-29-5分子量: C11H9N5O3S

全氟丁磺酸鉀分子式:338.19英文名稱:Potassium total fluoride:29420-49-3分子量: C4F9KO3S

乙型肝炎病毒前基因組LAMP試劑盒小鼠 PYGB 基因全長ORF克隆

甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達載體), 無標簽

大鼠 LAMTOR1 基因全長ORF克隆

食蟹猴 FGFR1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

BuB1 基因全長ORF克隆

大鼠 TIMP1 基因全長ORF克隆

ELSPBP1 基因全長ORF克隆

SETDB2 基因全長ORF克隆

TUBA3D 基因全長ORF克隆

CLGN 基因全長ORF克隆

大鼠 KIM1 / TIM1 / HAVCR1 基因全長ORF克隆

小鼠 CD274 / B7-H1 / PD-L1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

 

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