- 人APP基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WD10?
- 大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞;RS1優(yōu)惠活動
- 如何正確存儲E2檢測ELISA試劑盒?
- 人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒?”十月節(jié)日過后的專屬優(yōu)惠活動
- 黃牛皮膚細(xì)胞;BTA-S2?
- 庚肝抗體IgM檢測試劑盒的工作原理與應(yīng)用解析
- 大鼠多巴胺(DA)elisa試劑盒?開學(xué)季特惠”與中秋團(tuán)圓禮包活動火熱進(jìn)行
- 大鼠肌肉成纖維樣細(xì)胞;RM1九月開學(xué)季優(yōu)惠活動
- 小鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)elisa試劑盒?“八月中旬優(yōu)惠盛宴”
- 如何使用熒光定量RT-PCR試劑盒進(jìn)行實(shí)驗(yàn)
產(chǎn)品名稱:獸疫鏈球菌LAMP試劑盒
產(chǎn)品特點(diǎn):獸疫鏈球菌LAMP試劑盒上海一研生物相關(guān)產(chǎn)品:2,7-二溴-9-(9-十七烷)咔唑:563.462,7- -9- (9- dibromo seventeen alkyl carbazole):955964-73-5 C29H41Br2N氮磺酰:319.38Dabsyl hydrazine:72565-41-4 C14H17N5O2S3-氟-N-氧吡:113.093- -N-
產(chǎn)品型號:50次
更新日期:2021-03-03
訪問次數(shù):467
50次獸疫鏈球菌LAMP試劑盒的詳細(xì)資料:
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 | 獸疫鏈球菌LAMP試劑盒 |
英文名稱 | Lamp kit for Streptococcus zooepidemicus |
規(guī)格 | 50次 |
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
?
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
溴鋁:266.69Aluminium bromide:7727-15-3 AlBr3
2,3,6,7,10,11-六羥三亞水合物:324.292,3,6,7,10,11- six hydroxy Sanya hydrate:4877-80-9 C18H12O6·xH2O
2,7-二溴-9-(9-十七烷)咔唑:563.462,7- -9- (9- dibromo seventeen alkyl carbazole):955964-73-5 C29H41Br2N
氮磺酰:319.38Dabsyl hydrazine:72565-41-4 C14H17N5O2S
3-氟-N-氧吡:113.093- -N- oxidation:695-37-4 C5H4FNO
4--2,6-二氯嘧:163.994- two -2,6-:10132-07-7 C4H3Cl2N3
碳酸鋯鉀:Potassium carbonate:dgf
雙喹啉:396.95Double iodine:83-73-8 C9H5I2NO
新型殺螨劑New type of mite::560121-52-0
獸疫鏈球菌LAMP試劑盒小鼠 IL11RA / IL11Rα 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
人 CLEC4D 基因全長ORF克隆
小鼠 RPL36AL 基因全長ORF克隆
大鼠 CCNB1 基因全長ORF克隆
大鼠 CDH5 基因全長ORF克隆
人 CLEC11A 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
小鼠 HAVCR1 / TIM1 / TIMD1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
人 DGAT2 基因全長ORF克隆
人 STC2 / Stanniocalcin 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 S100A7A 基因全長ORF克隆
人 MMP16 基因全長ORF克隆
人 AOC3 基因全長ORF克隆
如果你對50次獸疫鏈球菌LAMP試劑盒感興趣,想了解更詳細(xì)的產(chǎn)品信息,填寫下表直接與廠家聯(lián)系: |