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產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：Mouse IL-15 protein

產(chǎn)品中文名稱：重組小鼠白介素-15（IL-15)

規(guī)格：5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

貨號(hào)：EY-01X8691
用途：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

特點(diǎn)&優(yōu)勢(shì):

標(biāo)簽:無標(biāo)簽

表達(dá)宿主:大腸桿菌

種屬:小鼠

序列:氨基酸序列來源于小鼠源：IL-15 蛋白（P48346）（Asn49Ser162）表達(dá)的蛋白片段，在 N 端用 6×His 標(biāo)簽表達(dá)。

活性:以其誘導(dǎo)CTLL-2 細(xì)胞增殖的能力來衡量。該效應(yīng)的ED50<10 ng/mL。重組小鼠IL-15 的特異性活性:約>1x 10? IU/mg。

蛋白長(zhǎng)度：該蛋白質(zhì)的計(jì)算分子量為 14.2 kDa，在還原條件下，蛋白質(zhì)遷移為 17 kDa（SDS-PAGE 分析）。

純度:> 98 % ，使用SDS-PAGE檢測(cè)

動(dòng)?動(dòng)

背景

白細(xì)胞介素-15（IL-15）是一種 14-15 kDa 的糖蛋白，在多種細(xì)胞類型中具有免疫調(diào)節(jié)功能。IL-15 可在多種細(xì)胞類型中組成型表達(dá)，作為細(xì)胞內(nèi)蛋白儲(chǔ)存在細(xì)胞質(zhì)中，也可轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞表面，但只能從某些細(xì)胞類型中分泌，包括單核細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、上皮細(xì)胞、骨髓基質(zhì)細(xì)胞和成纖維細(xì)胞。作為一種多效細(xì)胞因子，IL-15 在先天性免疫和適應(yīng)性免疫之間起著中介作用，其主要作用是殺死受病毒感染的細(xì)胞。IL-15 在 NK 細(xì)胞的發(fā)育、分化和存活過程中起著至關(guān)重要的作用。在單核細(xì)胞中，IL-15 可誘導(dǎo)產(chǎn)生 IL-8 和單核細(xì)胞趨化蛋白 1（MCP-1），從而將中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞募集到感染部位。IL-15 還可作為 T 淋巴細(xì)胞的趨化誘導(dǎo)劑，并調(diào)節(jié) T 淋巴細(xì)胞的分化。

本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):

 1.操作簡(jiǎn)便、快捷。可直接加入到檢測(cè)平板。在96-孔板中檢測(cè)時(shí),無需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測(cè)序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對(duì)照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。

公司正在出售的產(chǎn)品：

BrdU (Bromodeoxyuridine 50mgBrdU (Bromodeoxyuridine) 溴脫氧尿苷

ILKAP Protein Human 重組人 ILKAP 蛋白

TNFRSF10B重組小鼠 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

EPHA7 Protein Rat 重組大鼠 EphA7 / EHK3 蛋白

ERBB2重組人 HER2 / ErbB2 / CD340 (676-1255) 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

豚鼠白三烯B4(LTB4)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： LTB4 ELISA Kit

Two lymphoid tissue chemokine (SLC/CCL21) ELISA Kit 人二級(jí)淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)檢測(cè)試劑盒

rabbitSolubleprotein-100,S-100ELISAKit 兔子S100蛋白(S-100)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBeta-EPR(MouseBeta-Endorphieceptor)ELISAKit小鼠β內(nèi)啡肽受體

細(xì)菌鹽肉湯500毫升

RabbitHeatShockProtein40,HSP-40ELISAKit兔熱休克蛋白40(HSP-40)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人脂蛋白α(Lp-α)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人脂蛋白a（Lp-a）檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

人粘蛋白3(MUC3)ELISA 試劑盒

Human tumor necrosis factor soluble receptor I (TNFsR- I) ELISA Kit 人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)檢測(cè)試劑盒

HumanHistoneDeacetylase,HDELISAKit 人組織蛋白去乙酰化酶(HD)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanimmunosuppressiveacidicprotein,IAP檢測(cè)試劑盒人免疫抑制酸性蛋白(IAP)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-2)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Humanleukemiainhibitoryfactorreceptor，LIFRELISAKit人白血病抑制因子受體(LIFR)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

重組小鼠白介素-15（IL-15)TNFRSF10B重組小鼠 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

BrdU (Bromodeoxyuridine 50mgBrdU (Bromodeoxyuridine) 溴脫氧尿苷

ERBB2重組人 HER2 / ErbB2 / CD340 (676-1255) 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

ILKAP Protein Human 重組人 ILKAP 蛋白

EPHA7 Protein Rat 重組大鼠 EphA7 / EHK3 蛋白