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細胞簡介：

大鼠前列腺平滑肌分離自前列腺組織；前列腺（Prostate）是雄性的性腺器官；前列腺是不成對的實質(zhì)性器宮，由腺組織和肌組織構(gòu)成。前列腺如栗子，底朝上，與膀胱相貼，尖朝下，抵泌尿生殖膈，前面貼恥骨聯(lián)合，后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過，扼守著尿道上口，所以，前列腺有問題時，排尿首先受影響。前列腺是機體非常少有的，具有內(nèi)、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺，前列腺每天分泌前列腺液，是構(gòu)成精液主要成分；作為內(nèi)分泌腺，前列腺分泌的激素稱為“前列腺素"。前列腺平滑肌細胞是前列腺的重要結(jié)構(gòu)組成細胞之一，在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。前列腺平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠前列腺平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的大鼠前列腺平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)檢測試劑盒 ，英文名： FⅧAg ELISA Kit

Porcine hyaluronic acid (HA) ELISA Kit 豬透明質(zhì)酸(HA)檢測試劑盒

馬鈴薯特定基因序列(PATA)核酸檢測試劑盒 48T

CLIAKitforLSP(Humanliverspecificlipoprotein)ELISAKit人抗肝特異性脂蛋白抗體

通用AP酶聯(lián)檢測封閉溶液100毫升

ELISAKitIgY雞卵黃免疫球蛋白

KIT重組小鼠 c-kit / CD117 蛋白 Protein

Amylin 糖尿病相關(guān)肽(胰島淀粉樣肽 0.5mgAmylin 糖尿病相關(guān)肽(胰島淀粉樣肽)

IL36G重組人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169) Protein

CD22 Protein Human 重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白

IL1RN Protein Rat 重組大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 標簽)

Amylin 糖尿病相關(guān)肽(胰島淀粉樣肽 0.5mgAmylin 糖尿病相關(guān)肽(胰島淀粉樣肽)

CD22 Protein Human 重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白

KIT重組小鼠 c-kit / CD117 蛋白 Protein

IL1RN Protein Rat 重組大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 標簽)

IL36G重組人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169) Protein

小鼠氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)檢測試劑盒 96T/48T

Eighth factors in rats with associated aigen (F VIII Ag) ELISA Kit 大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)檢測試劑盒

Humanargininevasopressin,AVPELISAKit 人精加壓素(AVP)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitfor1,5-AG(Human1,5-anhydroglucitol)ELISAKit人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨

飲料三氯蔗糖(sucralose)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次

MouseLactateDehydrogenase,LDHELISAKit小鼠乳酸脫氫酶(LDH)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠前列腺平滑肌細胞小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。