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產(chǎn)品名稱:大鼠眼動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
產(chǎn)品特點(diǎn):大鼠眼動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品EPC, 大鼠血管內(nèi)皮祖細(xì)胞 Rattus Li-7 人肝癌細(xì)胞 人胰腺腺泡上皮癌;HPAC MDA-MB-415人腺癌細(xì)胞 MDA-MB-415 human breast adenocarcinoma cells L-15培養(yǎng)基+15%FBS 人表皮角質(zhì)細(xì)胞-新生兒(HEK-n)
產(chǎn)品型號(hào):
更新日期:2024-12-11
訪問(wèn)次數(shù):38
大鼠眼動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的詳細(xì)資料:
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
眼動(dòng)脈是眼眶及內(nèi)容物主要的血液供應(yīng),是頸內(nèi)動(dòng)脈主要分枝,也是交通顱內(nèi)外血管的重要通道。有研究結(jié)果認(rèn)為,絕大多數(shù)眼動(dòng)脈起源于ICA剛出海綿竇處,且多數(shù)起源于ICA床突上段內(nèi)上壁,少數(shù)起源于上壁,少數(shù)眼動(dòng)脈可起源于ICA海綿竇段及腦膜中動(dòng)脈。眼動(dòng)脈的走行分為顱內(nèi)段、管內(nèi)段及眶內(nèi)段,眼動(dòng)脈在管內(nèi)段一般行走于視神經(jīng)上方,顱內(nèi)段和眶內(nèi)段再分為五段:1、短臂;2、A角;3、長(zhǎng)臂;4、B角;5、遠(yuǎn)側(cè)部。眼動(dòng)脈進(jìn)入眶內(nèi)后沿視神經(jīng)向下外側(cè)走行,終止于眶孔的上內(nèi)側(cè)角。眼動(dòng)脈的分枝一般分為眼組、眶組及眶外組。眼組分為視網(wǎng)膜中央動(dòng)脈睫前動(dòng)脈及眼球的脈絡(luò)叢;眶組分為淚腺動(dòng)脈和肌動(dòng)脈;眶外組分為篩后動(dòng)脈、篩前動(dòng)脈、眶上動(dòng)脈、瞼內(nèi)側(cè)動(dòng)脈、鼻背動(dòng)脈(終末枝)。眼動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。眼動(dòng)脈供應(yīng)整個(gè)眼球、眼球附屬器及部分附近組織的營(yíng)養(yǎng)。眼動(dòng)脈可發(fā)生痙攣、血栓、栓塞及出血等,均可嚴(yán)重影響視力。頸內(nèi)動(dòng)脈眼動(dòng)脈瘤簡(jiǎn)稱眼動(dòng)脈瘤,又稱床突旁動(dòng)脈瘤或頸內(nèi)動(dòng)脈腹側(cè)動(dòng)脈瘤。眼動(dòng)脈瘤是位于眼動(dòng)脈和后交通動(dòng)脈之間的動(dòng)脈瘤,占全部顱內(nèi)動(dòng)脈瘤的0.47%~9.26%,30%~70%患者表現(xiàn)為SAH,1/3有視功能損傷,如視力減退、視野缺損和視神經(jīng)等。體外培養(yǎng)的眼動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠眼動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 眼動(dòng)脈 |
英文名稱 | Rat Ophthalmic Artery Smooth Muscle Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠眼動(dòng)脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠眼動(dòng)脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:
培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠眼動(dòng)脈平滑肌體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠降鈣素(CT)ELISA 試劑盒
Pigme epithelium derived factor (PEDF) ELISA Kit 人色素上皮衍生因子(PEDF)檢測(cè)試劑盒
HumangranulysinELISAKit 人顆粒溶素(granulysin)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-doublesandedDNA,dsDNA檢測(cè)試劑盒人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物脊髓過(guò)氧化酶(MPO)活性高質(zhì)敏感(DTNB)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
HumanXC-chemokinereceptor1,XCR1ELISAKit人XC趨化因子受體1(XCR1)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
IL12B重組絨猴 IL12B / IL-12B 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
NT-3 神經(jīng)生長(zhǎng)因子-3(抗原 0.5mgNT-3 神經(jīng)生長(zhǎng)因子-3(抗原)
ACVR2A重組人 ACVR2 / ACTRII / ACVR2A 蛋白 Protein
CD81 Protein Human 重組人 CD81 / TAPA-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
ANGPTL4 Protein Mouse 重組小鼠 ANGPTL4 蛋白
NT-3 神經(jīng)生長(zhǎng)因子-3(抗原 0.5mgNT-3 神經(jīng)生長(zhǎng)因子-3(抗原)
CD81 Protein Human 重組人 CD81 / TAPA-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IL12B重組絨猴 IL12B / IL-12B 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
ANGPTL4 Protein Mouse 重組小鼠 ANGPTL4 蛋白
ACVR2A重組人 ACVR2 / ACTRII / ACVR2A 蛋白 Protein
小鼠心肽(ANP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Gao Min rat thyroxine (u-T4) ELISA Kit 大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)檢測(cè)試劑盒
HumanHyaluronidase,HAaseELISAKit 人透明質(zhì)酸酶(HAase)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickenAvianLeukosisVirusAG,ALV-AG檢測(cè)試劑盒雞白血病病毒抗原(ALV-AG)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞BAX蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次
MousehighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
大鼠眼動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞小鼠血管抑素(mouse Angiostatin) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠載脂蛋白E(mouse APO E) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠B淋巴細(xì)胞刺激因子(mouse BAFF) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠凋亡因子BAX(mouse BAX) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
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