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產(chǎn)品名稱(chēng):人肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
產(chǎn)品特點(diǎn):人肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品HGC-27人胃癌細(xì)胞 細(xì)胞,HelaS3細(xì)胞 ES-2(卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞) 小鼠皮下脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基 興國(guó)鯉尾鰭細(xì)胞;XGL 人結(jié)腸癌細(xì)胞,SW480[SW-480]細(xì)胞 Tca-8113(舌鱗癌細(xì)胞) L-O2 人正常胎肝細(xì)胞 人皮膚成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品型號(hào):
更新日期:2024-12-11
訪(fǎng)問(wèn)次數(shù):32
人肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的詳細(xì)資料:
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
人肺大動(dòng)脈平滑肌分離自肺大動(dòng)脈組織;肺大動(dòng)脈亦稱(chēng)肺動(dòng)脈干。在呼吸空氣的脊椎動(dòng)物中,把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動(dòng)脈。肺大動(dòng)脈起于右心室,在主動(dòng)脈之前向左上后方斜行,在主動(dòng)脈弓下方分為左、右肺動(dòng)脈,經(jīng)肺門(mén)入肺。肺動(dòng)脈干位于心包內(nèi),為一粗短的動(dòng)脈干。起自右心室,在升主動(dòng)脈前方向左后上方斜行,至主動(dòng)脈弓下方分為左、右肺動(dòng)脈。左肺動(dòng)脈較短,在左主支氣管前方橫行,分二支進(jìn)入左肺上、下葉。右肺動(dòng)脈較長(zhǎng)而粗,經(jīng)升主動(dòng)脈和上腔靜脈后方向右橫行,至右肺門(mén)處分為三支進(jìn)入右肺上、中、下葉。肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞是肺血管的重要結(jié)構(gòu)細(xì)胞之一,在調(diào)控肺血管的收縮和舒張功能中有重要作用。肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的異常是肺動(dòng)脈高壓發(fā)生發(fā)展的重要病理學(xué)特征,其凋亡和增殖失衡是肺血管重塑的關(guān)鍵。研究表明,急性和慢性缺氧均可導(dǎo)致肺動(dòng)脈高壓,即缺氧性肺動(dòng)脈高壓,推斷缺氧可能是通過(guò)促進(jìn)肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的增殖而參與缺氧性肺動(dòng)脈高壓的發(fā)生發(fā)展。肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞主要功能:①細(xì)胞表面表達(dá)介質(zhì)(ICAM-1和VCAM-1)參與血管壁炎癥反應(yīng);②是多數(shù)重要?jiǎng)用}疾病的靶細(xì)胞。肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞與主要病生理變化:①平滑肌增生易致肺動(dòng)脈高壓;②先天性肺動(dòng)脈狹窄;③肺動(dòng)脈栓塞。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 人肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 肺動(dòng)脈組織 |
英文名稱(chēng) | Human Pulmonary Great Artery Smooth Muscle Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肺大動(dòng)脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肺大動(dòng)脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以?xún)?nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀(guān)察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,責(zé)任由客戶(hù)自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀(guān)察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶(hù)用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪(fǎng)直至問(wèn)題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔子高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA 試劑盒
People androstene two ketone (ASD) ELISA Kit 人雄(ASD)檢測(cè)試劑盒
Humanai-macrophageaibodyELISAKit 人抗巨噬細(xì)胞抗體(ai-macrophageAb)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanepidemicparotitis,EP檢測(cè)試劑盒人流行性腮腺(EP)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織PKG激酶總活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
HumanPancreaticPolypeptide,PPELISAKit人胰多肽(PP)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
FLT3重組小鼠 FLT-3 / CD135 / FLK-2 蛋白 Protein
紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)重組蛋白 Recombinant Erythropoietin Receptor (EPOR)
CRABP1重組人 CRABP1 / RBP5 蛋白 Protein
CDK5 Protein Human 重組人 CDK5 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
IL17A Protein Canine 重組狗 IL17 / IL17A 蛋白
紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)重組蛋白 Recombinant Erythropoietin Receptor (EPOR)
CDK5 Protein Human 重組人 CDK5 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
FLT3重組小鼠 FLT-3 / CD135 / FLK-2 蛋白 Protein
IL17A Protein Canine 重組狗 IL17 / IL17A 蛋白
CRABP1重組人 CRABP1 / RBP5 蛋白 Protein
小鼠K1(VK1)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat osteocalcin / bone gla protein (OT/BGP) ELISA Kit 大鼠骨鈣素/骨谷蛋白(OT/BGP)檢測(cè)試劑盒
HumanPeptidylprolylcis/ansisomerase,PPIELISAKit 人肽基脯氨酰順?lè)串悩?gòu)酶(PPI)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickenIerleukin4,IL-4檢測(cè)試劑盒雞白介素4(IL-4)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞IKB-ALPHA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次
Mouseglucoprotein130,gp130ELISAKit小鼠糖蛋白130(gp130)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
人肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞小鼠細(xì)胞色素氧化酶(CC0)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠(Cyt-C)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠細(xì)胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
如果你對(duì)人肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞感興趣,想了解更詳細(xì)的產(chǎn)品信息,填寫(xiě)下表直接與廠(chǎng)家聯(lián)系: |