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產(chǎn)品名稱:人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞
產(chǎn)品特點(diǎn):人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品HuH-7細(xì)胞,人肝癌細(xì)胞 小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞,P388D1細(xì)胞 小型豬腎細(xì)胞;MPK AHSG Others Mouse 小鼠 Fetuin-A / AHSG 人細(xì)胞裂解液 NCI-N87 [N87]人胃癌細(xì)胞 食管癌細(xì)胞,Ec109細(xì)胞 MG-63
產(chǎn)品型號(hào):
更新日期:2024-12-11
訪問(wèn)次數(shù):25
人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞的詳細(xì)資料:
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
人肝實(shí)質(zhì)分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官,并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里大的器官,位于機(jī)體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞是指具有肝功能的單位,是肝臟的基本組成單位之一。肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞與主要病生理變化:急性肝炎、肝硬化、肝膿腫。肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞屬于中高度分化細(xì)胞,生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)需求高,在體外存活時(shí)間短;細(xì)胞呈圓形或多角形,核大而圓,居中,常染色質(zhì)豐富,部分有雙核或多倍體核。肝臟作為體內(nèi)重要的器官,在整個(gè)物質(zhì)代謝過(guò)程中具有廣泛而多樣的作用。
產(chǎn)品名稱 | 人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 肝臟組織 |
英文名稱 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肝實(shí)質(zhì)采用混合酶灌流消化、反復(fù)低速離心制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人肝實(shí)質(zhì)經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔子免疫球蛋白G試劑盒 兔子免疫球蛋白G試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子免疫球蛋白G試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子免疫球蛋白G試劑盒、兔子免疫球蛋白G 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔子免疫球蛋白E試劑盒 兔子免疫球蛋白E試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子免疫球蛋白E試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子免疫球蛋白E試劑盒、兔子免疫球蛋白E 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔子免疫球蛋白A試劑盒 兔子免疫球蛋白A試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子免疫球蛋白A試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子免疫球蛋白A試劑盒、兔子免疫球蛋白A 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔子可溶性CD40配體試劑盒 兔子可溶性CD40配體試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子可溶性CD40配體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子可溶性CD40配體試劑盒、兔子可溶性CD40配體試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠白介素35(IL-35)試劑盒 96T/48T
Rat heat shock factor 1 (HSF1) ELISA Kit 大鼠熱休克因子1(HSF1)試劑盒
Humayrosinekinase2,Tyk-2ELISAKit 人酪激酶2(Tyk-2)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCalretinin,CR試劑盒人鈣結(jié)合蛋白(CR)試劑盒規(guī)格:96T/48T
重組逆轉(zhuǎn)錄病毒穩(wěn)態(tài)表達(dá)細(xì)胞克隆凍存試劑盒50次
Humansolubleierleukin-1receptorⅠ,IL-1sRⅠELISAKit人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)試劑盒規(guī)格:96T/48T
SDF2重組人 SDF2 蛋白 Protein
血小板生成素(TPO)重組蛋白 Recombinant Thrombopoietin (TPO)
HA重組甲型流感 H1N1 (A/California/07/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
GFPT1 Protein Human 重組人 GFPT1 / GFAT 蛋白
B18R Protein Vaccinia Virus 重組牛痘病毒 B18R / B19R 蛋白
血小板生成素(TPO)重組蛋白 Recombinant Thrombopoietin (TPO)
GFPT1 Protein Human 重組人 GFPT1 / GFAT 蛋白
SDF2重組人 SDF2 蛋白 Protein
B18R Protein Vaccinia Virus 重組牛痘病毒 B18R / B19R 蛋白
HA重組甲型流感 H1N1 (A/California/07/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞大鼠血小板激活因子(PAF)試劑盒 ,英文名: PAF ELISA Kit
Mouse calf iestinal alkaline phosphatase (CIAP) ELISA Kit 小鼠牛小腸堿性0酸酶(CIAP)試劑盒
MouseVascularEndothelialcellGrowthFactorD,VEGF-DELISAkit 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D(VEGF-D)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumancoagulationfactorII,FIIELISAKit人Ⅱ
細(xì)胞CDK6/CYCD1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitCAM大鼠鈣調(diào)素
如果你對(duì)人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞感興趣,想了解更詳細(xì)的產(chǎn)品信息,填寫下表直接與廠家聯(lián)系: |