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產(chǎn)品名稱:人骨髓單個(gè)核細(xì)胞
產(chǎn)品特點(diǎn):人骨髓單個(gè)核細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品IFNA4 Others Rat 大鼠 IFNA4 / IFNα4 / Ierferon alpha-4 人細(xì)胞裂解液 人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞裂解物HOPCL 肝竇內(nèi)皮細(xì)胞Many 豬晶狀體上皮細(xì)胞PlEpiC H1299 人肺腺癌細(xì)胞 P19 小鼠畸胎瘤細(xì)胞
產(chǎn)品型號(hào):
更新日期:2024-12-11
訪問(wèn)次數(shù):27
人骨髓單個(gè)核細(xì)胞的詳細(xì)資料:
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
人骨髓單個(gè)核分離自骨髓;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長(zhǎng)骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時(shí),紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單個(gè)核細(xì)胞是骨髓中具有單個(gè)核的細(xì)胞,包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。注意這里是(mononuclear cell)單個(gè)核細(xì)胞,而不是(Monocyte)單核細(xì)胞。單個(gè)核細(xì)胞的體積、形態(tài)和比重與骨髓其他細(xì)胞不同,利用一定比例聚蔗糖和鈉形成的等滲溶液作密度梯度離心,使一定密度的細(xì)胞按相應(yīng)密度梯度分布,可將各種血細(xì)胞與單個(gè)核分離。
產(chǎn)品名稱 | 人骨髓單個(gè)核細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 骨髓 |
英文名稱 | Human Bone Marrow Mononuclear Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人骨髓單個(gè)核采用取骨髓、通過(guò)密度梯度離心法制備而來(lái)制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人骨髓單個(gè)核經(jīng)檢測(cè),純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 半貼壁半懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2)檢測(cè)試劑盒 ,英文名: MMP2 ELISA Kit
Mouse histamine (HIS) ELISA Kit 小鼠組胺(HIS)檢測(cè)試劑盒
RatBladdeumoraigen,BTAELISAKit 大鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforFAELISAKit大鼠
細(xì)胞膠原蛋白(collagen)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Ratmyeloperoxidase,MPOELISAKit大鼠髓過(guò)氧化物酶(MPO)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
TIMD4重組小鼠 TIM4 / TIMD4 蛋白 Protein
Caspase-6 (CT 0.5mgCaspase-6 (CT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6(抗原)
FAM3B重組人 FAM3B 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
FABP3 Protein Human 重組人 FABP3 / H-FABP / M-FABP 蛋白
CSF1R Protein Rat 重組大鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白
Caspase-6 (CT 0.5mgCaspase-6 (CT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6(抗原)
FABP3 Protein Human 重組人 FABP3 / H-FABP / M-FABP 蛋白
TIMD4重組小鼠 TIM4 / TIMD4 蛋白 Protein
CSF1R Protein Rat 重組大鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白
FAM3B重組人 FAM3B 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
小鼠過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human adrenergic receptor a1A (ADRA1A) ELISA Kit 人能a1A受體(ADRA1A)檢測(cè)試劑盒
humanProstaglandinF,PG-FELISAKit 人前列腺素F(PGF)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-perinuclearfactor,APF檢測(cè)試劑盒人抗核周因子抗體(APF)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物細(xì)胞可溶性總蛋白制備試劑盒20次
Humayrosinehydroxylase,THELISAKit人酪羥化酶(TH)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
人骨髓單個(gè)核細(xì)胞小鼠α半乳糖基抗體(Gal)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠αN已?;咸擒彰?span>(αNAG)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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