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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀(guān)察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱(chēng)：人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞

英文名稱(chēng)：Human Ovarian Microvascular Endothelial Cells

組織來(lái)源：卵巢組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

人卵巢微血管內(nèi)皮分離自卵巢組織；卵巢是雌性動(dòng)物的生殖器官，卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類(lèi)固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同，僅左側(cè)發(fā)育（右側(cè)已退化），呈葡萄狀，均為處于不同發(fā)育時(shí)期的卵泡，卵泡呈黃色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。大多數(shù)脊椎動(dòng)物有兩個(gè)卵巢，但是部分魚(yú)類(lèi)的兩個(gè)卵巢融合為單個(gè)結(jié)構(gòu)，而所有鳥(niǎo)類(lèi)只有左側(cè)卵巢有機(jī)能。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對(duì)卵圓形的生殖器官，它的外表有一層上皮組織，其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周?chē)糠?，主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成；髓質(zhì)位于中央，由疏松結(jié)締組織構(gòu)成，其中有許多血管、淋巴管和神經(jīng)。微血管又稱(chēng)毛細(xì)血管。分布于各種組織和細(xì)胞間的微細(xì)的血管。介于微動(dòng)脈和微靜脈之間。平均直徑7～9微米，數(shù)量極多，成網(wǎng)狀分布。管壁由一層內(nèi)皮細(xì)胞及一薄層基膜組成，厚約0.5微米。基膜外面有薄層結(jié)締組織，其中有纖維細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和周細(xì)胞等。細(xì)的微血管由一個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞圍成管腔，較粗的微血管由2～3個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞圍成。分布于肌肉組織、神經(jīng)組織和結(jié)締組織中的微血管，內(nèi)皮細(xì)胞間為縫隙連接（縫隙寬150埃），稱(chēng)連續(xù)微血管。血管內(nèi)皮細(xì)胞在器官和組織的結(jié)構(gòu)和功能上起著非常重要的作用。并與多種疾病的發(fā)生與發(fā)展有關(guān)。近年來(lái)血管內(nèi)皮細(xì)胞在炎癥、休克等一系列病理生理改變中的重要性愈來(lái)愈受到人們的重視。研究發(fā)現(xiàn)，不同來(lái)源的內(nèi)皮細(xì)胞在生物學(xué)特征、結(jié)構(gòu)和功能等方面均存在一定差別，而同是微血管內(nèi)皮細(xì)胞，它們又存在器官和組織的特異性。

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人卵巢微血管內(nèi)皮采用膠原酶-混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、后通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人卵巢微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動(dòng)物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌

③ 防止機(jī)械損傷

④ 去除無(wú)用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類(lèi)型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動(dòng)物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密，不利于各個(gè)細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長(zhǎng)繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開(kāi)，使細(xì)胞解離出來(lái)。

(1)懸浮細(xì)胞的分離方法

組織材料若來(lái)自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。

(2)實(shí)體組織材料的分離方法

對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機(jī)械分散法

特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。

大鼠蛋白激酶Cη(PKCη)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： PKCη ELISA Kit

N end middle Osteocalcin (N-MID-OT) ELISA Kit 人N端中段骨鈣素(N-MID-OT)檢測(cè)試劑盒

Ratsolubleierleukin-1receptorⅠ,IL-1sRⅠELISAkit 大鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforCXCR3(MouseCXC-chemokinereceptor3)ELISAKIT小鼠CXC趨化因子受體3

細(xì)胞色素P450亞酶CYP2E1(MFC)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次

RatFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKiatFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKit大鼠IX(FIX)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

FGF21重組小鼠 FGF21 / Fibroblast Growth Factor 21 蛋白 Protein

A/H1N1-M2 Human(Avian influenza Matrix Protein-2 Human 0.5mgA/H1N1-M2 Human(Avian influenza Matrix Protein-2 Human) A型人流感病毒H1N1-M2蛋白多肽

CANT1重組人 CANT1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CHI3L2 Protein Human 重組人 CHI3L2 / YKL-39 蛋白

FGFR4 Protein Rat 重組大鼠 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白

蛋白激酶Cη(PKCη)重組蛋白 Recombinant Protein Kinase C Eta (PKCh)

CHI3L2 Protein Human 重組人 CHI3L2 / YKL-39 蛋白

NCSTN重組小鼠 Nicastrin / NCSTN 蛋白 Protein

IL10RA Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL10RA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

VAMP3重組人 VAMP3 / Cellubrevin 蛋白 Protein

小鼠糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ovarian cancer marker-CA125 CA125ELISA 人卵巢癌標(biāo)志物CA125檢測(cè)試劑盒

Humandeoxyuridineiphate,DPELISAKit 人脫氧尿三0酸(DP)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Chickenviruseeritis,DEV檢測(cè)試劑盒雞病毒性腸病毒(DEV)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞VEGF蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次

MouseEpithelialneuophilactivatingpeptide78,ENA-78ELISAKit小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞小鼠胎盤(pán)催乳素   英文名稱(chēng)：   Mouse placeal lactogen   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   PL

小鼠纖溶酶原激活劑抑制因子1   英文名稱(chēng)：   Mouse Plasminogen Activator Inhibitor 1   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   PAI-1

小鼠纖溶酶原激活劑抑制因子2   英文名稱(chēng)：   Mouse Plasminogen Activator Inhibitor 2   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   PAI-2

小鼠松弛素   英文名稱(chēng)：   Mouse Relaxin   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   RLN

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶(hù)協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿(mǎn)干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿(mǎn)培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用