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產(chǎn)品名稱:人髂動脈內(nèi)皮細胞

產(chǎn)品特點:人髂動脈內(nèi)皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品MES-13細胞,小鼠腎小球系膜細胞 K562(慢性髓原白血病) 豚鼠肺細胞;GP-F1 NRK-52E(大鼠小管導(dǎo)管上皮細胞) PANC-1, 人胰腺癌細胞 肝癌細胞,Hep G2細胞 U-937(組織細胞淋巴瘤細胞) 脂肪細胞系統(tǒng)

產(chǎn)品型號:

更新日期:2024-12-12

訪問次數(shù):25

人髂動脈內(nèi)皮細胞的詳細資料:

人髂動脈內(nèi)皮細胞

實驗報告:

人髂動脈內(nèi)皮細胞
一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

細胞簡介:

人髂動脈內(nèi)皮細胞

人髂動脈內(nèi)皮分離自髂動脈組織;髂總動脈位于人體的盆腔,人的髂總動脈有兩條,也就是臨床上左右兩條分支,它是由腹部主要的動脈演化而來,由腹部的腹主動脈沿著人體的脊柱方向向下進行,到達第4腰椎后開始分成兩支,這就是左右髂總動脈。動脈是介于心室與毛細血管之間的管道,它接近心室的部分,管徑大,管壁較厚。經(jīng)過反復(fù)分支,管徑逐漸變小,管壁變薄,后形成與毛細血管構(gòu)造相似的毛細血管前小動脈,與毛細血管相接。動脈的管徑大小和管壁的厚薄,雖相差很大,但構(gòu)造上均有共同之處。一般均由3層膜組成,內(nèi)層稱為內(nèi)膜,由內(nèi)皮及縱行排列的結(jié)締組織構(gòu)成;中間的一層稱為中膜,由環(huán)形排列的組織構(gòu)成;外的一層叫外膜,由縱行排列的結(jié)締組織構(gòu)成。動脈內(nèi)皮細胞是覆蓋在主動脈內(nèi)面的單層細胞,可分泌一系列血管活性物質(zhì)而保持血管穩(wěn)態(tài),當其受到炎癥或其它因素刺激后穩(wěn)態(tài)被破壞而導(dǎo)致一些心血管疾病的發(fā)生。因此,動脈內(nèi)皮細胞已成為研究心血管疾病發(fā)病機制及治療藥物的工具。內(nèi)皮細胞或血管內(nèi)皮是一薄層的專門上皮細胞,由一層扁平細胞所組成。它形成血管的內(nèi)壁,是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁(單層鱗狀上皮)的接口。內(nèi)皮細胞是沿著整個循環(huán)系統(tǒng),由心臟直至小的微血管。

產(chǎn)品名稱

人髂動脈內(nèi)皮細胞

組織來源

髂動脈

英文名稱

Human Lliac Artery   Endothelial Cells

產(chǎn)品規(guī)格

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

 

方法簡介:

人髂動脈內(nèi)皮細胞

公司實驗室分離的人髂動脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的人髂動脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

人髂動脈內(nèi)皮細胞

包被條件 PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

人髂動脈內(nèi)皮細胞

注意事項:

人髂動脈內(nèi)皮細胞
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題,責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。

9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

公司正在出售的產(chǎn)品:
人髂動脈內(nèi)皮細胞

小鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA 試劑盒

Human urokinase type plasminogen activator (uPA/PLAU) ELISA Kit 人型纖溶酶原激活物(uPA/PLAU)檢測試劑盒

HumanNuclearmaixprotein22,NMP-22ELISAKit 人核基質(zhì)蛋白22(NMP-22)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

guineapigmaixmetalloproteinase9,MMP-9檢測試劑盒豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

真菌/酵母細胞漿可溶性總蛋白制備試劑盒20

MouseBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISAKit小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

IL18R1重組小鼠 IL-18R1 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

C-fos(i mmediate early gene, ieg 0.5mgC-fos(i mmediate early gene, ieg) 即刻早期基因(是一種原癌基因)抗原

CSF2重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 Protein

IL36B Protein Human 重組人 IL36B / IL1F8 蛋白

FSTL3 Protein Mouse 重組小鼠 FLRG / Fstl3 蛋白

C-fos(i mmediate early gene, ieg 0.5mgC-fos(i mmediate early gene, ieg) 即刻早期基因(是一種原癌基因)抗原

IL36B Protein Human 重組人 IL36B / IL1F8 蛋白

IL18R1重組小鼠 IL-18R1 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

FSTL3 Protein Mouse 重組小鼠 FLRG / Fstl3 蛋白

CSF2重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 Protein

豚鼠膽囊收縮素/腸促肽(CCK)檢測試劑盒 ,英文名: CCK ELISA Kit

Human dopamine D2 receptor (D2R) ELISA Kit 人多巴胺D2受體(D2R)檢測試劑盒

Rabbitcholesterolesteransferprotein,CETPELISAKit 兔子酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBeta-TG(RabbitBeta-Thromboglobulin)ELISAKit兔子β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白

細菌銅ATP(Cu++-ATPase)活性比色法量檢測試劑盒20

rabbitInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISAKit兔子胰島素樣生長因子1(IGF-1)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

人髂動脈內(nèi)皮細胞人周期素依賴性激酶7(CDK-7)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人周期素依賴性激酶2(CDK-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人周期素依賴性激酶1(CDK-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISAKit   ELISA.   96T/48T


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