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產(chǎn)品名稱:人乳腺癌血管內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品特點(diǎn):人乳腺癌血管內(nèi)皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品MiaPaCa-2, 人胰腺癌細(xì)胞 Human LS 180(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞) 人急性淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞;MOLT-4 BA/F3細(xì)胞,小鼠原B細(xì)胞 人浸潤性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞,CCD-1095Sk細(xì)胞 NeuroFectagen? 神經(jīng)細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒
產(chǎn)品型號:
更新日期:2024-12-12
訪問次數(shù):23
人乳腺癌血管內(nèi)皮細(xì)胞的詳細(xì)資料:
實(shí)驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡介:
人乳腺癌血管內(nèi)皮分離自患有乳腺癌的女性乳腺組織;女性乳腺是由皮膚、纖維組織、乳腺腺體和脂肪組成的,乳腺癌是發(fā)生在乳腺腺上皮組織的惡性腫瘤。乳腺癌中99%發(fā)生在女性,男性僅占1%。乳腺并不是維持機(jī)體生命活動的重要器官,原位乳腺癌并不致命;但由于乳腺癌細(xì)胞喪失了正常細(xì)胞的特性,細(xì)胞之間連接松散,容易脫落。癌細(xì)胞一旦脫落,游離的癌細(xì)胞可以隨血液或淋巴液播散全身,形成轉(zhuǎn)移,危及生命。目前,乳腺癌已成為威脅女性身心健康的常見腫瘤。
產(chǎn)品名稱 | 人乳腺癌血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 組織來源 | 乳腺癌組織 |
英文名稱 | Human Mammary Cancer Vascular Endothelial Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡介:
公司實(shí)驗室分離的人乳腺癌血管內(nèi)皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗室分離的人乳腺癌血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
注意事項:
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠生長調(diào)節(jié)致癌基因γ(GROγ)檢測試劑盒 ,英文名: GROγ ELISA Kit
Mouse vitamin E (VE) ELISA Kit 小鼠(VE)檢測試劑盒
RatHistamine,HISELISAKit 大鼠組胺(HIS)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHDELISAKit大鼠組織蛋白去乙?;?/span>
細(xì)胞VEGFR1(FLT-1)激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitα-BGTα-銀環(huán)蛇毒素
EPHA3重組小鼠 EphA3 蛋白 Protein
降鈣素(CT)重組蛋白 Recombinant Calcitonin (CT)
CKM重組人 CKM / CK-MM 蛋白 Protein
CHST15 Protein Human 重組人 CHST15 / GALNAC4S-6ST / BRAG 蛋白
MET Protein Canine 重組狗 c-MET / HGFR 蛋白
降鈣素(CT)重組蛋白 Recombinant Calcitonin (CT)
CHST15 Protein Human 重組人 CHST15 / GALNAC4S-6ST / BRAG 蛋白
EPHA3重組小鼠 EphA3 蛋白 Protein
MET Protein Canine 重組狗 c-MET / HGFR 蛋白
CKM重組人 CKM / CK-MM 蛋白 Protein
小鼠胎盤生長因子(PLGF)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat activin A (Activin-A) ELISA Kit 大鼠活化素A(Activin-A)檢測試劑盒
Humangeneralanscriptioncomplex,GTCELISAKit 人通用轉(zhuǎn)錄復(fù)合體(GTC)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Deererythrocytemembraneprotein,EMP檢測試劑盒紅細(xì)胞膜蛋白(EMP)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞脘蛋白(PRION)蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次
MouseEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit小鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
人乳腺癌血管內(nèi)皮細(xì)胞小鼠酸性成纖維生長因子(mouse a-FGF) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠堿性成纖維生長因子(mouse b-FGF/FGF-2) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠Fibronectin(mouse Fibronectin) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠Flt3(mouse Flt3) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
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