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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：人直腸平滑肌細胞

英文名稱：Human Rectal Smooth Muscle Cells

組織來源：直腸組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

人直腸平滑肌分離自直腸組織；直腸為大腸的未段，位于小骨盆內(nèi)。上端平第3骶椎處接續(xù)乙狀結(jié)腸，沿骶骨和尾骨的前面下行，穿過盆膈，下端以而終。直腸上端的大小似結(jié)腸，其下端擴大成直腸壺腹，是糞便排出前的暫存部位，下端變細接管。直腸在盆腔內(nèi)的位置與骶椎腹面關系密切，與骶椎有相同的曲度。直腸周圍多脂肪、無縱帶，位于膀胱和生殖器官的背側(cè)。直腸平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。直腸的動脈血供主要是來自腸系膜下動脈的直腸上動脈，來自髂內(nèi)動脈的直腸中動脈和來自髂內(nèi)動脈的直腸下動脈。平滑肌收縮是胃腸蠕動中基本的運動方式；腸炎時由于平滑肌特殊肌動蛋白的增加導致了平滑肌層的增厚。平滑肌肌動蛋白可能影響收縮力的產(chǎn)生，這進一步證明了炎癥時的腸平滑肌細胞具有可塑性。利用腸平滑肌細胞的培養(yǎng)，可以幫助了解收縮、增殖和胃腸道結(jié)締組織對平滑肌細胞的反應。

公司實驗室分離的人直腸平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的人直腸平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結(jié)合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

小鼠鳥酸脫羧酶   英文名稱：   Mouse Ornithine Decarboxylase   規(guī)格：      英文縮寫：   ODC

小鼠卵清蛋白特異性IgE   英文名稱：   Mouse ovalbumin specific Immunoglobulin E   規(guī)格：      英文縮寫：   OVA sIgE

小鼠氧化低密度脂蛋白   英文名稱：   Mouse oxidized Low Density Lipoprotein   規(guī)格：      英文縮寫：   oxLDL

小鼠骨保護素   英文名稱：   Osteoprotegerin   規(guī)格：      英文縮寫：   OPG

小鼠絨毛膜(CG)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human enkephalin (ENK) ELISA Kit 人腦啡肽(ENK)試劑盒

HumanVacuolatingcytotoxinA,VacAELISAKit 人空泡毒素相關蛋白A(VacA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

guineapigImmunoglobulinE,IgE試劑盒豚鼠免疫球蛋白E(IgE)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細胞β-半乳糖苷酶活性超敏熒光定量試劑盒20次

MousecardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISAKit小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)試劑盒規(guī)格：96T/48T

IL6ST重組小鼠 IL6ST / gp130 / CD130 蛋白 Protein

alpha Adaptin/AP1 銜接蛋白α抗原 0.5mgalpha Adaptin/AP1 銜接蛋白α抗原

C1D重組人 C1D 蛋白 (GST 標簽) Protein

CPLX2 Protein Human 重組人 Complexin-2 / CPLX2 蛋白

BST1 Protein Rat 重組大鼠 CD157 / BST1 蛋白 (Fc 標簽)

胞外超氧化物歧化酶(SOD3)重組蛋白 Recombinant Superoxide Dismutase 3, Extracellular (SOD3)

CPLX2 Protein Human 重組人 Complexin-2 / CPLX2 蛋白

IgG2a重組小鼠 IgG2a-Fc 蛋白 Protein

CD59 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD59 / CD59A / MAC-IP 蛋白

AKR1C2重組人 AKR1C2 蛋白 Protein

人直腸平滑肌細胞大鼠平足蛋白(PDPN)試劑盒 ，英文名： PDPN ELISA Kit

Mouse thrombomodulin (TM) ELISA Kit 小鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)試劑盒

RatSubstanceP,SPELISAKit 大鼠P物質(zhì)(SP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGP-BB(HumanGlycogenphosphorylaseBB)ELISAKit人糖原0酸化酶同工酶BB

細胞調(diào)亡DNA條帶試劑盒10次

Ratthyroxine,T4ELISAKit大鼠甲狀腺素(T4)試劑盒規(guī)格：96T/48T

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用