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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：兔腸黏膜上皮細胞

英文名稱：Rabbit Intestinal Mucosal Epithelial Cells

組織來源：腸

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

兔腸黏膜上皮分離自腸道組織；腸道指的是從胃幽門至門的消化管。腸是消化管中長的一段，也是功能重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進行的，大腸主要濃縮食物殘渣，形成糞便，再通過直腸經(jīng)門排出體外。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足夠的養(yǎng)分，其實它的功能還遠不止此——它還是機體內(nèi)大的微生態(tài)系統(tǒng)。腸黏膜上皮細胞是機體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障，持續(xù)暴露于大量抗原中，也是機體面對病原微生物的道防線。因此，腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為先接觸抗原的細胞，在黏膜免疫反應的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用，它決定黏膜免疫反應的發(fā)生、性質(zhì)和強度。

實驗室分離的兔腸黏膜上皮采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的兔腸黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔腸黏膜上皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)：

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結(jié)合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

大鼠乙酰羧化酶α(ACACα)檢測試劑盒 ，英文名： ACACα ELISA Kit

Mouse Annexin V (ANX- V) ELISA Kit 小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)檢測試劑盒

MouseStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISAkit 小鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumandermato-poin,DPTELISAKit人皮膚蛋白

細胞Akt2/PKBβ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKiANKL大鼠核因子κB受體活化因子配基

IGFBP4重組小鼠 IGFBP4 蛋白 Protein

CK19 細胞角蛋白19抗原 0.5mgCK19 細胞角蛋白19抗原

IDH1重組人 IDH1 蛋白 Protein

HIST2H2BE Protein Human 重組人 Histone cluster 2 H2BE / HIST2H2BE 蛋白

S100A6 Protein Mouse 重組小鼠 S100A6 蛋白

CK19 細胞角蛋白19抗原 0.5mgCK19 細胞角蛋白19抗原

HIST2H2BE Protein Human 重組人 Histone cluster 2 H2BE / HIST2H2BE 蛋白

IGFBP4重組小鼠 IGFBP4 蛋白 Protein

S100A6 Protein Mouse 重組小鼠 S100A6 蛋白

IDH1重組人 IDH1 蛋白 Protein

小鼠N-乙酰基-絲酰-天門冬酰-賴酰-脯酸(AcSDKP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat glycogen phosphorylase isoenzyme MM (GP-MM) ELISA Kit 大鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)檢測試劑盒

Humaestoterone,TELISAKit 人睪酮(T)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumancoagulationfactorⅫ,FⅫ檢測試劑盒人Ⅻ(FⅫ)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

組化染色操作20樣本

Humaelaxin,RLNELISAKit人松弛肽/松弛素(RLN)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔腸黏膜上皮細胞兔內(nèi)皮抑素(rabbit ES)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

兔內(nèi)啡肽-b(rabbit Endorphin-b)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

兔雌二醇(rabbi E2)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

兔上腺素(rabbit EPI)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用