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產(chǎn)品名稱:小鼠骨細(xì)胞
產(chǎn)品特點(diǎn):小鼠骨細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品人小梁網(wǎng)細(xì)胞總RNAHTMC NA T-47D(人管癌細(xì)胞) 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;BALB/C 3T3 EFNA5 Others Human 人 EphrinA5 人細(xì)胞裂解液 VRK1 Others Human 人 VRK1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液
產(chǎn)品型號(hào):
更新日期:2024-12-16
訪問次數(shù):18
小鼠骨細(xì)胞的詳細(xì)資料:
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠骨分離自骨組織;骨組織的細(xì)胞成分包括骨原細(xì)胞、成骨細(xì)胞、骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞。只有骨細(xì)胞存在于骨組織內(nèi),其他三種細(xì)胞均位于骨組織的邊緣。骨細(xì)胞(Osteocyte)是人體骨骼中主要的細(xì)胞成分。在成年人骨骼中,骨細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)量的90%~95%,大約是成骨細(xì)胞數(shù)量的20倍。骨細(xì)胞生長(zhǎng)在骨骼內(nèi)部的骨基質(zhì)中。骨細(xì)胞的細(xì)胞體呈梭形或類圓形,位于基質(zhì)構(gòu)成的骨陷窩內(nèi)。與神經(jīng)細(xì)胞類似,每個(gè)骨細(xì)胞具有大量向外延伸的突觸,而這些突觸均位于由骨基質(zhì)構(gòu)成的骨小管結(jié)構(gòu)中。通過這些突觸,骨細(xì)胞能夠與骨表面的細(xì)胞、周圍其它的骨細(xì)胞進(jìn)行“交流"。普遍認(rèn)為,骨細(xì)胞起源于成骨細(xì)胞。在骨形成的終末階段,成骨細(xì)胞將可能有3種不同的歸宿:分化成為骨細(xì)胞、轉(zhuǎn)移至骨表面成為暫不活動(dòng)的成骨細(xì)胞、進(jìn)入程序死亡過程(凋亡)。骨細(xì)胞為扁橢圓形多突起的細(xì)胞,核亦扁圓、染色深。胞質(zhì)弱嗜堿性。電鏡下,胞質(zhì)內(nèi)有少量溶酶體、線粒體和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),高爾基復(fù)合體亦不發(fā)達(dá)。骨細(xì)胞夾在相鄰兩層骨板間或分散排列于骨板內(nèi)。相鄰骨細(xì)胞的突起之間有縫隙連接。在骨基質(zhì)中,骨細(xì)胞胞體所占據(jù)的橢圓形小腔,稱為骨陷窩,其突起所在的空間稱骨小管。相鄰的骨陷窩借骨小管彼此通連。骨陷窩和骨小管內(nèi)均含有組織液,骨細(xì)胞從中獲得養(yǎng)分。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠骨細(xì)胞 | 組織來源 | 骨組織 |
英文名稱 | Mouse Osteocyte Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨采用膠原酶消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨經(jīng)骨鈣素免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
轉(zhuǎn)基因植物NPTⅡ基因核酸試劑盒 48T
轉(zhuǎn)基因植物Bar基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
轉(zhuǎn)基因植物Bar基因核酸試劑盒 48T
轉(zhuǎn)基因植物TE基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
豬胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA 試劑盒
Human cyclic adenosine monophosphate (cAMP) ELISA Kit 人環(huán)0酸腺苷(cAMP)試劑盒
RabbitEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit 兔內(nèi)皮型合成酶(eNOS)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAP12ELISAKit大鼠apelin12
血清樣品液相法去內(nèi)毒素試劑盒20次
PorcineIerleukin13,IL-13ELISAKit豬白介素13(IL-13)試劑盒
CD47重組大鼠 CD47 蛋白 Protein
GFAP(Glial Fibrillary Acidic Protein 0.5mgGFAP(Glial Fibrillary Acidic Protein) 膠質(zhì)纖維酸性蛋白(抗原)
STK16重組人 STK16 / PKL12 / MPSK 蛋白 (His & NusA 標(biāo)簽) Protein
BPI Protein Human 重組人 BPI 蛋白 (His 標(biāo)簽)
PLA2G1B Protein Mouse 重組小鼠 PLA2G1B / Phospholipase-A2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
GFAP(Glial Fibrillary Acidic Protein 0.5mgGFAP(Glial Fibrillary Acidic Protein) 膠質(zhì)纖維酸性蛋白(抗原)
BPI Protein Human 重組人 BPI 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CD47重組大鼠 CD47 蛋白 Protein
PLA2G1B Protein Mouse 重組小鼠 PLA2G1B / Phospholipase-A2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
STK16重組人 STK16 / PKL12 / MPSK 蛋白 (His & NusA 標(biāo)簽) Protein
小鼠骨細(xì)胞大鼠骨鈣素(OT)試劑盒 ,英文名: OT ELISA Kit
Rabbit ierleukin 1 (IL-1) ELISA Kit 兔子白介素1(IL-1)試劑盒
肺鏈球菌(SP)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMLCK(Humanmyosinlightchainkinase)ELISAKit人肌球蛋白輕鏈激酶
體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-9)明膠法比色定量試劑盒20次
ELISAKitT犬睪同
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