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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

小鼠毛囊分離自皮膚毛囊組織；毛囊是表皮細胞連續(xù)形成的袋樣上皮。其基底是真皮凹進的真皮毛乳頭，中心是一根毛發(fā)，立毛肌的一側斜附在毛囊壁上，附著點的上方為皮脂腺通入毛囊的短頸，毛囊在皮膚表面的開口是毛囊孔。毛囊位于真皮和皮下組織中，毛囊向下伸入真皮約有一厘米深度，它是由包繞毛發(fā)與表皮相連的上皮鞘，以及皮脂腺和立毛肌所組成的一個結構比較復雜的器官附件組織。毛囊實際上是由結締組織和上皮兩部分所組成，除了具有結締組織和血管的真皮乳頭（毛乳頭）外，毛囊其余部分都是由表皮細胞分化而來。毛囊開口起始于皮膚表面，而每個毛囊又和一個或多個腺胞相連。每個腺胞解離成富含脂質(zhì)的物質(zhì)，卻又通過一個共同和毛囊相通連的皮脂腺導管將分泌物運送到皮膚表面排出。

公司實驗室分離的小鼠毛囊采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的小鼠毛囊經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

大鼠硫氧還蛋白還原酶1(xR1)檢測試劑盒 ，英文名： xR1 ELISA Kit

Mouse proinsulin (PI) ELISA Kit 小鼠胰島素原(PI)檢測試劑盒

RatSuperOxidaseDimase,SODELISAKit 大鼠超氧化物歧化酶(SOD)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGDH/GLDH(HumanGlamatedehydrogenase)ELISAKit人谷脫氫酶

細胞元素熒光定量檢測試劑盒20次

RatsecretedphospholipaseA2,sPLA2ELISAKit大鼠分泌型0脂酶A2(sPLA2)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

PDCD1重組小鼠 PD1 / PDCD1 蛋白 Protein

Cecropin 抗菌肽/天蠶素(多肽 0.5mgCecropin 抗菌肽/天蠶素(多肽)

KYNU重組人 KYNU / Kynureninase 蛋白 Protein

CTSD Protein Human 重組人 Cathepsin D / CTSD 蛋白

CD226 Protein Mouse 重組小鼠 CD226 / DNAM-1 蛋白 (His & Fc 標簽)

Cecropin 抗菌肽/天蠶素(多肽 0.5mgCecropin 抗菌肽/天蠶素(多肽)

CTSD Protein Human 重組人 Cathepsin D / CTSD 蛋白

PDCD1重組小鼠 PD1 / PDCD1 蛋白 Protein

CD226 Protein Mouse 重組小鼠 CD226 / DNAM-1 蛋白 (His & Fc 標簽)

KYNU重組人 KYNU / Kynureninase 蛋白 Protein

小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human tetanus aibody (Tetanus Ab) ELISA Kit 人破傷風抗體(Tetanus Ab)檢測試劑盒

Humanfattyacid-bindingprotein,FABPELISAKit 人脂肪酸結合蛋白(FABP)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanAcetylcholinesterase,AChE檢測試劑盒人乙酰酯酶(AChE)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

正常人體腎組織S9組分(5毫克/毫升)500微升

Mouseai-cardiolipinaibodyIgG,ACA-IgGELISAKit小鼠抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠毛囊細胞小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠鐵蛋白(FE)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠酶2(CA-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用