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產(chǎn)品名稱:小鼠食管成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品特點(diǎn):小鼠食管成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞cDNAHASMC cDNA tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-2D1 木瓜蛋白酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL 人腦瘤細(xì)胞;SF17 人腸平滑肌細(xì)胞(HISMC)RA, 大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞 Rattus H125

產(chǎn)品型號(hào):

更新日期:2024-12-17

訪問次數(shù):14

小鼠食管成纖維細(xì)胞的詳細(xì)資料:

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

小鼠食管成纖維細(xì)胞

小鼠食管成纖維分離自食管組織;食管是咽和胃之間的消化管,食管在系統(tǒng)發(fā)生上起初很短,隨著頸部的伸長(zhǎng)和心肺的下降,而逐漸增長(zhǎng)。食管可分為頸段、胸段和腹段。脊椎動(dòng)物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端,胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi),胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連,腹段很短與胃相連。在發(fā)育過程中,食管的上皮細(xì)胞增殖,由單層變?yōu)閺?fù)層,食管使管腔變狹窄,甚至一度閉鎖,以后管腔又重新出現(xiàn)。哺乳動(dòng)物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層:黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中,黏膜層,包括上皮、固有層和黏膜肌層。食管的外膜,由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,富有血管、淋巴管及神經(jīng)。主要包含食管成纖維細(xì)胞,成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長(zhǎng),不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長(zhǎng),平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

產(chǎn)品名稱

小鼠食管成纖維細(xì)胞

組織來源

食管

英文名稱

Mouse Esophageal   Fibroblast Cells

產(chǎn)品規(guī)格

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

 

方法簡(jiǎn)介:

小鼠食管成纖維細(xì)胞

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠食管成纖維采用 - 膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠食管成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

小鼠食管成纖維細(xì)胞

培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBS、bFGF、InsulinPenicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

傳代特性:可傳2-3代左右

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO25%

小鼠食管成纖維體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

小鼠食管成纖維細(xì)胞

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

小鼠食管成纖維細(xì)胞
一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

小鼠食管成纖維細(xì)胞
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠食管成纖維細(xì)胞

小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β2(mouse TGF-β2)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進(jìn)口分裝

小鼠可溶性粒細(xì)胞靶受體(mouse sEM-1)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進(jìn)口分裝

小鼠端粒酶(mouse Telomerase)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進(jìn)口分裝

小鼠Toll樣受體-2(mouse TLR-2)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進(jìn)口分裝

小鼠氧化型高密度脂蛋白(ox-HDL)試劑盒 96T/48T

Human soluble platelet endothelial cell adhesion molecule 1 (sPECAM-1/sCD31) ELISA Kit 人可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)試劑盒

HumanAtaxiatelangiectasiamated,ATMELISAKit 人毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變基因(ATM)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor12-HETE(Human20-hydroxyeicosateaenoicacid)ELISAKit12羥二十烷四烯酸

飲料檸檬酸比色法定量試劑盒20

MouseLactoferrin,LTF/LFELISAKit小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)試劑盒規(guī)格:96T/48T

NBL1重組小鼠 NBL1 / DAND1 / DAN 蛋白 Protein

半乳糖凝集素2(GAL2)重組蛋白 Recombinant Galectin 2 (GAL2)

NRAS重組人 NRAS 蛋白 Protein

CD22 Protein Human 重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白

CD274 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白

半乳糖凝集素2(GAL2)重組蛋白 Recombinant Galectin 2 (GAL2)

CD22 Protein Human 重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白

NBL1重組小鼠 NBL1 / DAND1 / DAN 蛋白 Protein

CD274 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白

NRAS重組人 NRAS 蛋白 Protein

小鼠食管成纖維細(xì)胞大鼠多肽YY/酪酪肽(PYY)試劑盒 ,英文名: PYY ELISA Kit

Porcine hydrocoisone (HYD) ELISA Kit 豬輕化1(HYD)試劑盒

動(dòng)物源性成分(18S)核酸試劑盒 48T

CLIAKitforLy6a(Humanlymphocyteaigen6complexlocusA)ELISAKit人淋巴細(xì)胞抗原6復(fù)合物基因座A

體液總抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量試劑盒50

ELISAKitNO雞血清

注意事項(xiàng):

小鼠食管成纖維細(xì)胞
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。

9.注意: 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。


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