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產(chǎn)品名稱:小鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品特點:小鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞;U937 [U-937] tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-3C3 彈性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3-VP16-TNFa CXCL12 Others Human
產(chǎn)品型號:
更新日期:2024-12-17
訪問次數(shù):13
小鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞的詳細(xì)資料:
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡介:
小鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮分離自視網(wǎng)膜組織;視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連,由色素上皮細(xì)胞組成,它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細(xì)胞、遮光、散熱以及再生和修復(fù)等作用。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層,由外向內(nèi)分別為:色素上皮層、視錐、視桿細(xì)胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜,有感光作用;后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個神經(jīng)元組成。神經(jīng)元是視細(xì)胞層,專司感光,它包括錐細(xì)胞和桿細(xì)胞。視桿細(xì)胞主要在離中心凹較遠(yuǎn)的視網(wǎng)膜上,而視錐細(xì)胞則在中心凹處多。層叫雙節(jié)細(xì)胞,約有10到數(shù)百個視細(xì)胞通過雙節(jié)細(xì)胞與一個神經(jīng)節(jié)細(xì)胞相聯(lián)系,負(fù)責(zé)聯(lián)絡(luò)作用。第三層叫節(jié)細(xì)胞層,專管傳導(dǎo)。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu),它貼于眼球的后壁部,傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面,經(jīng)由視神經(jīng)到達(dá)出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區(qū),其分辨能力強。它是組成血管腔面單層扁平上皮樣細(xì)胞,它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用,在視網(wǎng)膜血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學(xué)意義。由于從不同的組織和器官獲得的內(nèi)皮細(xì)胞具有不同的特性,在腦和視網(wǎng)膜中,這些內(nèi)皮細(xì)胞具有內(nèi)屏障的功能,在調(diào)節(jié)血管生理狀態(tài),釋放血管活性物質(zhì)以及新生血管的形成中發(fā)揮著重要作用,體外分離培養(yǎng)RCEC對研究視網(wǎng)膜血管性疾病發(fā)生發(fā)展的病理生理機制以及疾病的早期防治具有重要臨床意義。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 組織來源 | 視網(wǎng)膜組織 |
英文名稱 | Mouse Retinal Microvascular Endothelial Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮采用膠原酶-混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、后通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
注意事項:
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISAKit ELISA. 96T/48T
中文名稱 方法 規(guī)格
小鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠血小板因子3(PF-3)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human soluble ansferrin receptor (sTfR) ELISA Kit 人可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(sTfR)試劑盒
Human5-Nucleotidase,5-ELISAKit 人5核苷酸酶(5-)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
(pIKBAlpha)ELISAKit大鼠0酸化核因子κB抑制蛋白α
飲料糖精(saccharin)含量紅外光譜法定量試劑盒20次
Mouseisletcellaibody,ICAELISAKit小鼠胰島細(xì)胞抗體(ICA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
REG4重組小鼠 REG4 / GISP / RELP 蛋白 Protein
AMACR/P504S(alpha-methylacyl-CoA racemase 0.5mgAMACR/P504S(alpha-methylacyl-CoA racemase) α-甲基?;缚乖?/span>
IL36A重組人 IL1F6 / IL36 蛋白 (aa 6-158) Protein
CD276 Protein Human 重組人 B7-H3 / CD276 蛋白
TNFSF15 Protein Rat 重組大鼠 TNFSF15 / TL1A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
AMACR/P504S(alpha-methylacyl-CoA racemase 0.5mgAMACR/P504S(alpha-methylacyl-CoA racemase) α-甲基酰基消旋酶抗原
CD276 Protein Human 重組人 B7-H3 / CD276 蛋白
REG4重組小鼠 REG4 / GISP / RELP 蛋白 Protein
TNFSF15 Protein Rat 重組大鼠 TNFSF15 / TL1A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IL36A重組人 IL1F6 / IL36 蛋白 (aa 6-158) Protein
小鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠頂體蛋白(ACR)試劑盒 ,英文名: ACR ELISA Kit
Porcine growth hormone releasing peptide GHR 豬生長激素釋放肽ghr
木瓜特定基因序列(Papaya)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforLTB4(HumanLeukoieneB4)ELISAKit人白三烯B4
體液組織蛋白酶B(CATHEPSINB)活性熒光定量試劑盒20次
ELISAKitHsp-60雞熱休克蛋白60
如果你對小鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞感興趣,想了解更詳細(xì)的產(chǎn)品信息,填寫下表直接與廠家聯(lián)系: |