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產(chǎn)品名稱:小鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞
產(chǎn)品特點(diǎn):小鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品山羊腎上皮樣細(xì)胞;DG-K1 小鼠成骨細(xì)胞培養(yǎng)基 人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞;THP-1 FRhK-4(恒河猴胚腎細(xì)胞) CL-0307SW1116(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞) 大耳山羊腎細(xì)胞;LDG-2 LTEP-a-2細(xì)胞,人肺腺癌細(xì)胞 猴腎細(xì)胞系
產(chǎn)品型號(hào):
更新日期:2024-12-17
訪問次數(shù):11
小鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞的詳細(xì)資料:
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡介:
小鼠外周血來源內(nèi)皮祖分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。內(nèi)皮祖細(xì)胞是血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞,亦稱為成血管細(xì)胞(Angioblast),是一群具有游走特性,能進(jìn)一步增殖分化的幼稚內(nèi)皮細(xì)胞,缺乏成熟內(nèi)皮細(xì)胞的特征性表型,不能形成管腔樣結(jié)構(gòu),其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發(fā)生和血管損傷后的修復(fù)。研究顯示,內(nèi)皮祖細(xì)胞在心腦血管疾病、外周血管疾病、腫瘤血管形成及創(chuàng)傷愈合等方面均發(fā)揮重要作用,并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路,EPCs生物學(xué)特性和治療作用的研究成為這一領(lǐng)域新的熱點(diǎn)。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞 | 組織來源 | 外周血 |
英文名稱 | Mouse Peripheral Blood-Derived Endothelial Progenitor Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血來源內(nèi)皮祖采用采集外周血、密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血來源內(nèi)皮祖經(jīng)CD34免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代;不建議多次傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠原肌球蛋白2β(TPM2)檢測(cè)試劑盒 ,英文名: TPM2 ELISA Kit
Mouse ovarian cancer marker CA125ELISA Kit 小鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125檢測(cè)試劑盒
Mousemacrophageinflammatoryprotein3β,MIP-3βELISAkit 小鼠巨噬細(xì)胞性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanEsogen-inducedproteinpS2ELISAKit人雌激素誘導(dǎo)蛋白PS2
細(xì)胞/組織線粒體DNA萃取試劑盒10次
ELISAKitMYO/MB大鼠肌紅蛋白
PDPN重組小鼠 Podoplanin / PDPN 蛋白 Protein
白介素9(IL9)重組蛋白 Recombinant Interleukin 9 (IL9)
DUSP3重組人 DUSP3 / VHR 蛋白 Protein
DDOST Protein Human 重組人 DDOST / OST48 蛋白
THY1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD90 / THY-1 蛋白
Annexin II 膜粘連蛋白-2抗原 0.5mgAnnexin II 膜粘連蛋白-2抗原
DDOST Protein Human 重組人 DDOST / OST48 蛋白
F2重組小鼠 Coagulation Factor II / FII / F2 蛋白 Protein
CD59 Protein Rat 重組大鼠 CD59 / CD59A / MAC / IP 蛋白
MSN重組人 MSN / Moesin 蛋白 (aa 1-346, His 標(biāo)簽) Protein
小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)Elisa 試劑盒 96T/48T
Rat macrophage inflammatory protein 3 alpha (MIP-3 alpha /CCL20) ELISA Kit 大鼠巨噬細(xì)胞性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)檢測(cè)試劑盒
HumanFibrinogenlikepeptide2,fgl2ELISAKit 人纖維介素蛋白(fgl2)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanaldehydedehydrogenase,ALDH檢測(cè)試劑盒人乙脫氫酶(ALDH)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物P型氫ATP酶(H+-ATPase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
Mouse6-keto-prostaglandin,6-K-PGELISAKit小鼠6同前列腺素(6-K-PG)檢測(cè)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞小鼠肌紅蛋白檢測(cè)試劑盒 小鼠肌紅蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠肌紅蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:檢測(cè)試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠肌紅蛋白試劑盒、小鼠肌紅蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠肌肝檢測(cè)試劑盒 小鼠肌肝試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠肌肝試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:檢測(cè)試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠肌肝試劑盒、小鼠肌肝eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠肌鈣蛋白檢測(cè)試劑盒 小鼠肌鈣蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠肌鈣蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:檢測(cè)試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠肌鈣蛋白試劑盒、小鼠肌鈣蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠活化蛋白檢測(cè)試劑盒 小鼠活化蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠活化蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:檢測(cè)試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠活化蛋白試劑盒、小鼠活化蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
如果你對(duì)小鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞感興趣,想了解更詳細(xì)的產(chǎn)品信息,填寫下表直接與廠家聯(lián)系: |