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產(chǎn)品名稱:人食管癌成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品特點(diǎn):人食管癌成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品NA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) 人細(xì)胞裂解液 KITLG Others Mouse 小鼠 SCF / C-kit ligand 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液

產(chǎn)品型號(hào):

更新日期:2024-12-12

訪問次數(shù):27

人食管癌成纖維細(xì)胞的詳細(xì)資料:

人食管癌成纖維細(xì)胞

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

人食管癌成纖維細(xì)胞
一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

細(xì)胞簡介:

人食管癌成纖維細(xì)胞

人食管癌成纖維分離自食管癌組織;食管癌是常見的消化道腫瘤,每年約有30萬人死于食管癌。其發(fā)病率和死亡率各國差異很大。我國是世界上食管癌高發(fā)地區(qū)之一,每年平均病死約15萬人。男多于女,發(fā)病年齡多在40歲以上。食管癌典型的癥狀為進(jìn)行性咽下困難,先是難咽干的食物,繼而是半流質(zhì)食物,后水和唾液也不能咽下。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

產(chǎn)品名稱

人食管癌成纖維細(xì)胞

組織來源

食管癌

英文名稱

Human Esophageal   Cancer Fibroblast Cells

產(chǎn)品規(guī)格

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

 

方法簡介:

人食管癌成纖維細(xì)胞

實(shí)驗(yàn)室分離的人食管癌成纖維采用 - 膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實(shí)驗(yàn)室分離的人食管癌成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

人食管癌成纖維細(xì)胞

培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

傳代特性:可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%CO2,5%

人食管癌成纖維體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

人食管癌成纖維細(xì)胞

注意事項(xiàng):

人食管癌成纖維細(xì)胞
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。

9.注意: 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。

公司正在出售的產(chǎn)品:
人食管癌成纖維細(xì)胞

大鼠蛋白激酶抑制因子γ(PKIγ)檢測試劑盒 ,英文名: PKIγ ELISA Kit

L phenylalanine ammonia lyase (PAL) ELISA Kit L苯解氨酶(PAL)檢測試劑盒

RatIerleukin5,IL-5ELISAKIT 大鼠白介素5(IL-5)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforCyclin-D3ELISAKit大鼠細(xì)胞周期素D3

細(xì)胞色素P450亞酶CYP2C19(CEC)活性熒光定量檢測試劑盒20

RatFibronectin,FNELISAKit大鼠纖連蛋白(FN)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

DLL1重組大鼠 DLL1 / Delta-like Protein 1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CRF (Corticotropin-Releasing Factor 0.5mgCRF (Corticotropin-Releasing Factor) 促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子

AGO3重組人 AGO3 / Argonaute 3 / EIF2C3 蛋白 Protein

IL17RC Protein Human 重組人 IL17RC 蛋白 (aa 1-454, His 標(biāo)簽)

EPOR Protein Mouse 重組小鼠 EPOR 蛋白

CRF (Corticotropin-Releasing Factor 0.5mgCRF (Corticotropin-Releasing Factor) 促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子

IL17RC Protein Human 重組人 IL17RC 蛋白 (aa 1-454, His 標(biāo)簽)

DLL1重組大鼠 DLL1 / Delta-like Protein 1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

EPOR Protein Mouse 重組小鼠 EPOR 蛋白

AGO3重組人 AGO3 / Argonaute 3 / EIF2C3 蛋白 Protein

豚鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human cytotoxin associated protein A (CagA) ELISA Kit 人細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白A(CagA)檢測試劑盒

Humanai-cardiolipinaibodyIgM,ACA-IgMELISAKit 人抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancaneouslymphocyte-associatedaigen,CLA檢測試劑盒人皮膚淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原(CLA)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

組織EPHB3激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

humanprogestinandadipoQreceptorfamilymember,PAQR7ELISAKit人孕同和adipoQ受體家族成員Ⅶ(PAQR7)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

人食管癌成纖維細(xì)胞(羥甲基)基鹽酸鹽   100g

is,Hydrochloride   500g

曲拉通X-100   100ml

itonX-100   250ml


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