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產(chǎn)品名稱:小鼠呼吸道上皮細(xì)胞

產(chǎn)品特點(diǎn):小鼠呼吸道上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品人小細(xì)胞肺癌;NCI-H2227 人紅系白血病細(xì)胞;TF-1 小鼠腦瘤細(xì)胞;BC3H1 MCF 7B(人癌細(xì)胞) BHK(幼倉鼠腎細(xì)胞) 人羊膜細(xì)胞;WISH F2 Others Mouse 小鼠 FII / F2 / Thrombin 人細(xì)胞裂解液

產(chǎn)品型號:

更新日期:2024-12-16

訪問次數(shù):20

小鼠呼吸道上皮細(xì)胞的詳細(xì)資料:

小鼠呼吸道上皮細(xì)胞

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

小鼠呼吸道上皮細(xì)胞
一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

細(xì)胞簡介:

小鼠呼吸道上皮細(xì)胞

小鼠呼吸道上皮分離自呼吸道;呼吸道是肺呼吸時氣流所經(jīng)過的通道,有肺脊椎動物的呼吸道分上、下兩部:鼻、咽和喉合稱上呼吸道。氣管及其以后一分再分的管道,合稱為下呼吸道,或稱為氣管樹。氣管樹是隨著動物的進(jìn)化逐漸復(fù)雜化的。整個呼吸道內(nèi)表面都分布有分泌液和纖毛(鼻孔、咽后壁和聲帶黏膜除外),它能溫暖(或冷卻)、濕潤和凈化吸入的空氣,對于呼吸器官和機(jī)體有著保護(hù)作用。呼吸道以骨或軟骨做支架,其內(nèi)表面覆蓋著黏膜,黏膜內(nèi)分布著豐富的毛細(xì)血管。呼吸道上皮細(xì)胞屬于假復(fù)層纖毛柱狀上皮,分布于呼吸道的內(nèi)表面,主要由柱狀,杯形,梭形和錐形等不同形狀細(xì)胞組成。看上去像復(fù)層上皮,但實(shí)際上所有細(xì)胞底部均附于基膜上,屬單層上皮,故稱假復(fù)層柱狀上皮,上皮表面有纖毛,杯狀細(xì)胞可分泌粘液,包裹著大量細(xì)菌,借助纖毛不斷擺動將其慢慢移動至出消化道。

產(chǎn)品名稱

小鼠呼吸道上皮細(xì)胞

組織來源

呼吸道

英文名稱

Mouse Respiratory   Epithelial Cells

產(chǎn)品規(guī)格

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

 

方法簡介:

小鼠呼吸道上皮細(xì)胞

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠呼吸道上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠呼吸道上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

小鼠呼吸道上皮細(xì)胞

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO25%

小鼠呼吸道上皮細(xì)胞

注意事項(xiàng):

小鼠呼吸道上皮細(xì)胞
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。

9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠呼吸道上皮細(xì)胞

大鼠I型膠原(COL1)檢測試劑盒 ,英文名: COL1 ELISA Kit

Mouse secretory immunoglobulin A (sIgA) ELISA Kit 小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)檢測試劑盒

ELISA 小鼠血小板生成素(mouse TPO)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforICAM-3/CD50ELISAKit大鼠細(xì)胞間粘附分子3

通用型嗜肺軍團(tuán)菌(Legionellapneumophilia)試劑盒20

ELISAKitPLGF大鼠胎盤生長因子

SELP重組小鼠 SELP / selectin P / P-selectin 蛋白 Protein

紅細(xì)胞補(bǔ)體受體1(CR1)重組蛋白 Recombinant Complement Receptor 1, Erythrocyte (CR1)

TSPAN7重組人 TALLA-1 / TSPAN7 蛋白 Protein

CSNK2A2 Protein Human 重組人 CSNK2A2 / CK2A2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

IL17A Protein Marmoset 重組絨猴 IL17 / IL17A 蛋白

紅細(xì)胞補(bǔ)體受體1(CR1)重組蛋白 Recombinant Complement Receptor 1, Erythrocyte (CR1)

CSNK2A2 Protein Human 重組人 CSNK2A2 / CK2A2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

SELP重組小鼠 SELP / selectin P / P-selectin 蛋白 Protein

IL17A Protein Marmoset 重組絨猴 IL17 / IL17A 蛋白

TSPAN7重組人 TALLA-1 / TSPAN7 蛋白 Protein

小鼠型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat thyroid peroxidase (TPO) ELISA Kit 大鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)檢測試劑盒

Humanasialoglycoproteieceptor,ASGPRELISAKit 人去唾液酸糖蛋白受體(ASGPR)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Human28SribosomeRNPaibody,28SrRNP檢測試劑盒人28S抗核糖體抗體(28SrRNP)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

真菌/酵母腺苷酸激酶(Adenylatekinase)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20

Mouseai-zonapellucidaaibody,aZPELISAKit小鼠抗透明帶抗體(aZP)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

小鼠呼吸道上皮細(xì)胞小鼠可溶性 P- 選擇素 (mouse sP-Selectin/ sCD62P)   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   美國 R&D

小鼠轉(zhuǎn)化生長因子 -β1 (mouse TGF-β1)   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   奧地利 Bender

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子 -1(mouse TIMP-1)   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   美國 R&D

小鼠壞死因子 - a (mouse TNF- a )   作用:   ELISA   規(guī)格:   96T   法國 Diaclone


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